Konfokālo lāzermikroskopu pamatprincipi
Konfokālās lāzera mikroskopijas pamatā ir "konfokālā" tehnoloģija. Šī tehnoloģija izmanto punktveida gaismas avotu (parasti lāzeru) un īpašu optisko sistēmu, lai attēlveidošanas procesā tiktu izgaismots un attēlots tikai fokusa punktā esošais paraugs, bet ārpus fokusa punkta esošās zonas tiek ignorētas. Šī selektīvā apgaismojuma un noteikšanas metode ievērojami uzlabo attēla izšķirtspēju un kontrastu.
1. Gaismas avots
Konfokālie mikroskopi izmanto lāzerus kā gaismas avotus, jo lāzeriem ir augsta vienkrāsainība, saskaņotība un virziens. Šīs īpašības ļauj lāzeriem nodrošināt stabilu apgaismojumu un precīzu stara fokusēšanas vadību.
2. Apgaismojuma sistēma
Apgaismojuma sistēmā ietilpst lāzers un skenēšanas iekārta. Lāzera stars ātri pārvietojas caur skenēšanas ierīci (parasti galvanometru), lai panāktu parauga skenēšanu pa punktam. Šī skenēšanas metode ļauj lāzera staram izveidot parauga fokusa punktu sēriju, tādējādi panākot parauga slāņa attēlveidošanu.
3. Konfokālā apertūra
Starp mikroskopa objektīvu un paraugu ir konfokālā apertūra. Šīs apertūras funkcija ir ierobežot attēlveidošanas dziļumu, un detektors var uztvert tikai gaismu, kas iet caur šo diafragmu. Tādā veidā detektorā var iekļūt tikai fokusa punkta gaisma, savukārt gaisma ārpus fokusa punkta tiek bloķēta.
4. Objektīva lēca
Objektīva lēca ir galvenā konfokālās mikroskopijas sastāvdaļa, kas ir atbildīga par lāzera fokusēšanu uz paraugu un parauga atstarotās vai izstarotās gaismas savākšanu. Augstas kvalitātes objektīvi var nodrošināt augstas{1}}izšķirtspējas attēlu.
5. Detektors
Detektors ir atbildīgs par gaismas uztveršanu, kas iziet cauri konfokālajai apertūrai, un pārveido to elektriskajā signālā. Pēc tam šie elektriskie signāli tiek apstrādāti, lai radītu attēlus.
6. Attēlu apstrāde
Konfokālās mikroskopijas radītie neapstrādātie dati ir divu{0}}dimensiju attēlu sērija, kas jāapstrādā datora programmatūrai, lai rekonstruētu trīsdimensiju attēlus. Šis process ietver attēla pārklājumu, uzlabošanu un 3D rekonstrukciju.
