Bioloģiskais mikroskops attiecībā uz audu bloku tilpumu
Bioloģiskā mikroskopija Līdz šim fiksācija aukstā veidā, saldēta ultraplāna griešana un žāvēšana liofilizācijā ir ierastas metodes audu un šūnu rentgena mikrosekcijai. Tālāk ir sniegta sīkāka informācija par šo metodi.
Bioloģiskie mikroskopi. Mikroskopiem ar kondensatoru kondensatoru var pārvietot uz augšu un uz leju, lai sasniegtu mērenu spilgtumu. Turklāt mainīgo gaismas diožu apertūru var mainīt, lai sasniegtu mērenu 9b spilgtumu. Ja gaisma ir spilgta, var atbilstoši pacelt kondensatoru un attiecīgi palielināt mainīgās gaismas apertūru. Ja gaisma ir pārāk spēcīga, kondensatoru var atbilstoši nolaist un attiecīgi samazināt šķērsgaismas stara atvērumu. Ja šajā situācijā joprojām jūtaties žilbinoši, varat izvēlēties piemērotu filtru un novietot to uz kronšteina zem kondensatora. Tādā veidā jūs varat iegūt tādu spilgtumu, kas jūs apmierina. Protams, ir nepieciešams zināms prakses periods, lai iegūtu pieredzi kondensatora augšējās un apakšējās pozīcijas regulēšanā, lai panāktu mainīgu diafragmas atvēruma izmēru un atbilstošu filtru izvēli.
Ļoti svarīgs jautājums bioloģiskajā mikroskopijā ir tas, ka šūnu savākšanas un atdalīšanas procesā, pēc liofilizēšanas un sveķu iestrādāšanas (FD), pēc īpaši plānu granulu sasaldēšanas un pēc žāvēšanas ar liofilizāciju katras daļas 65 elementu saturam jāanalizē ļoti rūpīgi un absolūti Nebojājiet analizējamās šūnas. Jo rentgena mikrozonu analīze ietver ne tikai daudzus soļus, bet arī maksā daudz. Ja pēc ilga laika un vairākiem soļiem analizētās šūnas ir bojātas vai mirušas šūnas, būtu žēl izdarīt nepareizus secinājumus. Piemēram, kardiomiocītiem, kas izolēti pēc apstrādes ar kolagenāzi, ir divas formas, viena ir gara stieņa forma, bet otra ir apaļa. Pēdējās ir mirstošas šūnas, kas tiek bojātas šūnu izolācijas laikā.
Bioloģiskā mikroskopija Elektrolītu saturs un sadalījums šajos divu veidu šūnās ir ļoti atšķirīgs. Na ir ļoti augsts un K ir ļoti zems apaļajos kardiomiocītos, un Ca koncentrācija lineārajos zaros ir ļoti augsta. Pārbaudot ar citām analīzes metodēm, tika pierādīts, ka augstais Na un zemais K līmenis apaļajās šūnās un augstais ca mitohondrijās ir saistīts ar šūnu membrānas bojājumiem šūnu atdalīšanas procesā. Šūnu un audu aukstās fiksācijas metode bieži vien ir tos vispirms atdzesēt un fiksēt, un pēc tam uzglabāt šķidrā slāpeklī. Dzēšana un fiksācija ir ļoti svarīga saglabāšanas efektam. Dzīvās šūnas vai svaigi audi ir bagāti ar ūdeni. Dzēšot, šūnas vai audu daļas, kas ir tiešā saskarē ar kriogēnu (īpaši, ja rūgts ar šķidro slāpekli), vispirms tiek sasaldētas un fiksētas, tādējādi veidojot "čaulu", kas traucē Šūnu centrālā daļa tika sasmalcināta. un auksti fiksēts. Tāpēc, veicot X-line mikrozonu analīzi, bieži tiek konstatēts, ka lielāku šūnu centrā ir ledus kristāli. Lai tas nenotiktu, kā drupināto aukstumaģentu tiek izmantota viela ar augstāku kušanas temperatūru nekā šķidrajam slāpeklim, bet zemāka sausuma pakāpe (-806c). Tādu vielu ir daudz, taču vienkāršākais un lētākais ir koncentrētais propāns (viršanas temperatūra - 42.120c, kušanas temperatūra - 187.10c, molekulmasa 44.1), un arī dzesēšanas ātrums ir ātrākais. Bet tā trūkums ir tas, ka tas ir viegli uzliesmojošs.
Bioloģiskais mikroskops var novietot muskuļu šķiedru uz īpaša rāmja. Kad muskuļu šķiedru kontrakcija sasniedz noteiktu fāzi un ir jānostiprina, uzgalis tiek nekavējoties iedarbināts, lai izsmidzinātu šķidru propānu uz muskuļu šķiedru, lai to nodzēstu un nostiprinātu. Tad muskuļu šķiedras kopā ar rāmi tika izņemtas un ievietotas šķidrā slāpeklī. Ja asins šūnas vai atdalītas šūnas ir fiksētas, vispirms centrifugējiet ar mazu ātrumu, lai koncentrētu šūnas, pārnesiet šūnas uz nelielu sudraba caurulīti ar labu siltumvadītspēju, ievietojiet cauruli šķidrā propānā un sasaldējiet, lai to nostiprinātu. Fiksējot žurkas aizkuņģa dziedzeri Hall laboratorijā, vispirms atdzesējiet divus tērauda blokus ar šķidro hēliju (vai šķidro slāpekli), saspiediet divus vara blokus ar knaiblēm un novietojiet tos pirms un pēc aizkuņģa dziedzera, lai dzēstu un fiksētu dzemdes dziedzeri. . Audus vai šūnas var dzēst un fiksēt un pēc tam pārnest uz šķidro slāpekli ilgstošai uzglabāšanai.
