Mikroorganismu skaita noteikšana - mikroskopiskā tiešās skaitīšanas metode!
Fundamentāls
Mikroskopiskā tiešās skaitīšanas metode ir vienkārša, ātra un intuitīva metode, kā nelielu testējamā parauga suspensijas daudzumu novietot uz speciāla stikla priekšmetstikliņa (pazīstams arī kā baktēriju skaitītājs) ar noteiktu laukumu un tilpumu, un skaitīt tieši zem tā. mikroskopu. Pašlaik mājās un ārzemēs plaši izmantotie baktēriju skaitītāji ir: asins šūnu skaitīšanas panelis, Peteroff-Hauser baktēriju skaitītājs un Hawksley baktēriju skaitītājs utt. Tos visus var izmantot, lai skaitītu suspensijas, piemēram, rauga, baktēriju un pelējuma sporas. pamatprincipi ir vienādi. Pēdējo divu baktēriju skaitītāju kopējais tilpums ir 0.02 mm3 pēc tam, kad tie ir pārklāti ar vāka stiklu, un attālums starp vāka stiklu un priekšmetstikliņu ir tikai 0,02 mm, tāpēc mazas šūnas, piemēram, baktērijas var novērot un saskaitīt ar eļļas imersijas objektīvu. Papildus šo baktēriju skaitītāju izmantošanai ir arī novērtēšanas metode, kas ļauj tieši novērot uztriepes laukuma attiecību pret redzes lauka laukumu mikroskopā. Šo metodi parasti izmanto piena bakterioloģiskai izmeklēšanai. Mikroskopa tiešās skaitīšanas metodes priekšrocība ir tā, ka tā ir intuitīva, ātra un viegli lietojama. Bet šīs metodes trūkums ir tāds, ka izmērītie rezultāti parasti ir mirušo un dzīvo baktēriju summa. Pašlaik ir dažas metodes, lai novērstu šo trūkumu, piemēram, apvienojot dzīvās baktērijas, kas iekrāso mikrokameru kultūru (īsu laiku) un pievienojot šūnu dalīšanās inhibitorus, lai sasniegtu mērķi skaitīt tikai dzīvas baktērijas.
Šajā eksperimentā hemocitometrs tika izmantots kā piemērs, lai veiktu tiešu skaitīšanu mikroskopā. Pārējo divu baktēriju skaitītāju lietošanas metodes, lūdzu, skatiet katra ražotāja instrukcijās. Tiešā skaitīšana zem mikroskopa ar hemocitometru ir plaši izmantota mikrobu skaitīšanas metode. Skaitīšanas dēlis ir īpaši izgatavots stikla slaids, uz kura četras spraugas veido trīs platformas; platākā platforma vidū ir sadalīta divās daļās ar īsu horizontālu spraugu, un katra platformas puse ir izklāta ar režģi. Katrs režģis ir sadalīts deviņos lielos kvadrātos, un vidējais lielais kvadrāts ir skaitīšanas kamera. Skaitīšanas telpas mērogā parasti ir divas specifikācijas, viena ir tāda, ka liels kvadrāts ir sadalīts 25 vidējos kvadrātos, un katrs vidējais kvadrāts ir sadalīts 16 mazos kvadrātos; otrs ir tas, ka liels kvadrāts ir sadalīts 16 vidējos kvadrātos, un katrs vidējais kvadrāts ir sadalīts 25 mazos kvadrātos, bet neatkarīgi no tā, kāda veida skaitīšanas dēlis ir 400 mazi kvadrāti. katrs lielais laukums. Katra lielā kvadrāta malas garums ir 1 mm, un katra lielā kvadrāta laukums ir 1 mm 2. Pēc pārsega stikla aizsegšanas augstums starp vāka stiklu un bīdāmo stiklu ir 0,1 mm, tātad aizsega tilpums. skaitīšanas kamera ir 0,1 mm (viena desmittūkstošā daļa no mililitra).
