Atšķirība starp fluorescences mikroskopu un lāzera konfokālo mikroskopu
fluorescējošais mikroskops
1. Fluorescences mikroskopā kā gaismas avots tiek izmantota ultravioletā gaisma, ko izmanto, lai apstarotu atklāto objektu, lai tas izstarotu fluorescenci, un pēc tam novēro objekta formu un novietojumu zem mikroskopa. Fluorescences mikroskopu izmanto, lai pētītu ķīmisko vielu uzsūkšanos, transportēšanu, izplatību un atrašanās vietu šūnās. Dažas vielas šūnās, piemēram, hlorofils, var fluorescēt pēc ultravioleto staru apstarošanas; Citas vielas nevar fluorescēt pašas par sevi, taču tās var fluorescēt pēc krāsošanas ar fluorescējošām krāsvielām vai fluorescējošām antivielām un apstarošanas ar ultravioletajiem stariem. Fluorescences mikroskops ir viens no instrumentiem šo vielu kvalitatīvai un kvantitatīvai izpētei.
2, fluorescences mikroskopa princips:
a) Gaismas avots: gaismas avots izstaro dažāda viļņa garuma gaismu (no ultravioletā līdz infrasarkanajam).
b) ierosmes filtra gaismas avots: raida gaismu ar noteiktu viļņa garumu, kas var likt paraugam fluorescēt, vienlaikus bloķējot gaismu, kas ir nederīga ierosmes fluorescencei.
c) Fluorescējoši paraugi: parasti iekrāso ar fluorescējošiem pigmentiem.
d) Bloķējošs filtrs: bloķē ierosmes gaismu, ko paraugs neabsorbē, lai selektīvi pārraidītu fluorescenci, un daži fluorescences viļņu garumi tiek arī selektīvi pārraidīti. Mikroskops, kas izmanto ultravioleto gaismu kā gaismas avotu, lai apstarotais objekts izstaro fluorescenci. Elektronu mikroskopu pirmo reizi samontēja Knohls un Ha Roska Berlīnē 1931. gadā. Šajā mikroskopā gaismas stara vietā tiek izmantots ātrgaitas elektronu stars. Tā kā elektronu plūsmas viļņa garums ir daudz īsāks nekā gaismas viļņam, elektronu mikroskopa palielinājums var sasniegt 800 tūkstošus reižu, un minimālā izšķirtspējas robeža ir 0,2 nanometri. Skenējošais elektronu mikroskops, ko sāka izmantot 1963. gadā, var likt cilvēkiem redzēt sīkās struktūras uz objektu virsmas.
3. Pielietojuma joma: izmanto, lai palielinātu sīku objektu attēlu. To parasti izmanto bioloģijas, medicīnas un mikroskopisko daļiņu novērošanai.
Konfokālais mikroskops
1. Konfokālais mikroskops atstarotās gaismas optiskajā ceļā pievieno daļēji atstarojošu puslēcu, kas lauž caur objektīvu izgājušo atstaroto gaismu citos virzienos. Tā fokusā ir deflektors ar caurumu, un caurums atrodas fokusā. Aiz deflektora ir fotopavairotāja caurule. Var iedomāties, ka atstarotā gaisma pirms un pēc noteikšanas gaismas fokusa iet caur šo konfokālo sistēmu un netiks fokusēta uz mazo caurumu, bet to bloķēs deflektors. Tātad fotometrs mēra atstarotās gaismas intensitāti fokusā.
2. Princips: tradicionālajā optiskajā mikroskopā tiek izmantots lauka gaismas avots, un katra parauga punkta attēlu traucēs blakus esošo punktu difrakcija vai izkliedētā gaisma; Lāzerskenējošais konfokālais mikroskops skenē katru parauga fokusa plaknes punktu, izmantojot punktveida gaismas avotu, ko veido lāzera stars, kas iet caur apgaismojuma caurumu. Parauga apstarotais punkts tiek attēlots noteikšanas caurumā, ko punktu pa punktam vai līniju pa punktam uztver fotopavairotāja caurule (PMT) vai auksti savienota ierīce (cCCD) pēc adatas cauruma noteikšanas, un ātri veidojas fluorescējošs attēls. datora monitora ekrāns. Apgaismojuma caurums un noteikšanas adatas caurums ir konjugēti attiecībā pret objektīva lēcas fokusa plakni, un fokusa plaknes punkti fokusējas uz apgaismojuma caurumu un emisijas caurumu vienlaikus, un punkti ārpus fokusa plaknes netiks fokusēti. attēlots noteikšanas caurumā, lai iegūtais konfokālais attēls būtu parauga optiskais šķērsgriezums, kas novērš kopējā mikroskopa izplūdušā attēla defektu.
3. Pielietojuma jomas: ietver medicīnu, dzīvnieku un augu izpēti, bioķīmiju, bakterioloģiju, šūnu bioloģiju, audus un embrijus, pārtikas zinātni, ģenētiku, farmakoloģiju, fizioloģiju, optiku, patoloģiju, botāniku, neirozinātni, jūras bioloģiju, materiālu zinātni, elektronisko zinātni, mehānika, naftas ģeoloģija un mineraloģija.
