Vai esat kādreiz sapratis fāzes kontrasta mikroskopijas pamatprincipus?
Fāzu kontrasta mikroskopu 1935. gadā izgudroja holandiešu zinātnieks Zernike, lai novērotu nekrāsotus paraugus. Dzīvām šūnām un nekrāsotiem bioloģiskiem paraugiem, ņemot vērā katras šūnas daļas refrakcijas koeficienta un mikrostruktūras biezuma atšķirību, gaismas vilnim ejot cauri, viļņa garums un amplitūda nemainās, mainās tikai fāze (amplitūdas atšķirība). ), kas cilvēka acij ir neredzams. novērot. Fāzes kontrasta mikroskops maina fāzes starpību un izmanto gaismas difrakcijas un traucējumu parādības, lai mainītu fāzes atšķirību amplitūdas starpībā, lai novērotu dzīvas šūnas un nekrāsotus paraugus. Atšķirība starp fāzes kontrasta mikroskopu un parasto mikroskopu ir tāda, ka mainīgas diafragmas vietā tiek izmantota gredzenveida diafragma, parastā objektīva lēcas vietā tiek izmantota objektīva lēca ar fāzes plāksni, kā arī tiek nodrošināts teleskops koaksialitātei.
Fāzes kontrasta mikroskopijas pamatprincipi:
Izmantojot refrakcijas koeficienta un biezuma atšķirību starp dažādām objekta konstrukcijas sastāvdaļām, optiskā ceļa atšķirība, kas iet caur dažādām objekta daļām, tiek pārveidota par amplitūdas (gaismas intensitātes) starpību un caur kondensatora lēcu ar gredzenveida diafragmu un fāzes atšķirība ar fāzes plāksni Objektīva lēca realizē novērošanas mikroskopu. To galvenokārt izmanto, lai novērotu dzīvas šūnas vai nekrāsotas audu daļas, un dažreiz to var izmantot arī, lai novērotu iekrāsotus paraugus, kuriem trūkst kontrasta.
Caur paraugu ejošās redzamās gaismas optiskā ceļa atšķirība tiek mainīta uz amplitūdas starpību, tādējādi uzlabojot kontrastu starp dažādām struktūrām un padarot dažādas struktūras skaidri redzamas. Gaisma tiek lauzta pēc izlaišanas caur paraugu, novirzās no sākotnējā optiskā ceļa un aizkavējas par 1/4λ (viļņa garums). Ja to palielina vai samazina par 1/4λ, optiskā ceļa starpība kļūst par 1/2λ, un divi stari traucē pēc gaismas ass Stiprināt, palielināt vai samazināt amplitūdu, uzlabot kontrastu.
Fāzu kontrasta mikroskopam ir divas funkcijas, kuru citiem mikroskopiem nav: ① tas atdala tiešo gaismu (fona gaismu redzes laukā) no gaismas, ko izkliedē objekts; ② tas noņem apmēram pusi no fāzes viļņa garuma, lai tas nevarētu mijiedarboties, kā rezultātā mainās intensitāte.
