Kā fluorescences mikroskopija atšķiras no konfokālās lāzera mikroskopijas
Fluorescences mikroskops
1. Fluorescences mikroskops izmanto ultravioleto gaismu kā gaismas avotu, lai apgaismotu pārbaudāmo objektu, lai tas izstarotu fluorescenci, un pēc tam novēro objekta formu un atrašanās vietu zem mikroskopa. Fluorescences mikroskopiju izmanto, lai pētītu vielu absorbciju un transportēšanu šūnās, kā arī ķīmisko vielu izplatību un novietojumu. Dažas vielas šūnās, piemēram, hlorofils, var fluorescēt pēc ultravioleto staru apstarošanas; dažas vielas pašas nevar fluorescēt, bet, ja tās ir iekrāsotas ar fluorescējošām krāsvielām vai fluorescējošām antivielām, tās var fluorescēt pēc apstarošanas ar ultravioletajiem stariem. Fluorescences mikroskopija ir viens no rīkiem šādu vielu kvalitatīvai un kvantitatīvai izpētei.
2. Fluorescences mikroskopa princips:
(A) Gaismas avots: gaismas avots izstaro dažāda viļņa garuma gaismu (no ultravioletā līdz infrasarkanajam).
(B) ierosmes filtra gaismas avots: pārraida noteikta viļņa garuma gaismu, kas var izraisīt parauga fluorescēšanu, vienlaikus bloķējot gaismu, kas nav noderīga fluorescences stimulēšanai.
(C) Fluorescējoši paraugi: parasti iekrāso ar fluorescējošiem pigmentiem.
(D) Bloķējošs filtrs: bloķē ierosmes gaismu, ko paraugs neabsorbē, un selektīvi pārraida fluorescenci. Daži fluorescences viļņu garumi tiek arī selektīvi pārraidīti. Mikroskops, kas izmanto ultravioleto gaismu kā gaismas avotu, lai izraisītu apgaismotā objekta fluorescēšanu. Elektronu mikroskopu pirmo reizi montēja 1931. gadā Berlīnē, Vācijā, Knors un Halovska. Šajā mikroskopā gaismas stara vietā tiek izmantots ātrgaitas elektronu stars. Tā kā elektronu plūsmas viļņa garums ir daudz īsāks nekā gaismas, elektronu mikroskopa palielinājums var sasniegt 800,000 reizes, un minimālā izšķirtspējas robeža ir 0,2 nanometri. Skenējošais elektronu mikroskops, ko sāka izmantot 1963. gadā, ļauj cilvēkiem redzēt sīkās struktūras uz objektu virsmas.
3. Pielietojuma joma: izmanto, lai palielinātu mazu objektu attēlus. Parasti izmanto bioloģijas, medicīnas, mikroskopisko daļiņu uc novērošanai.
konfokālais mikroskops
1. Konfokālais mikroskops atstarotās gaismas optiskajam ceļam pievieno daļēji atstarojošu puslēcu, kas lauž caur lēcu izgājušo atstaroto gaismu citos virzienos. Fokusā ir deflektors ar adatas caurumu, un tas atrodas Fokusa punktā, aiz deflektora, ir fotopavairotāja caurule. Var iedomāties, ka atstarotā gaisma pirms un pēc noteikšanas gaismas fokusa iet caur šo konfokālo sistēmu un nevar tikt fokusēta uz mazo caurumu, un to bloķēs deflektors. Tātad, ko mēra fotometrs, ir fokusā atstarotās gaismas intensitāte.
2. Princips: tradicionālajos optiskajos mikroskopos tiek izmantoti lauka gaismas avoti, un katra parauga punkta attēlu traucēs difrakcija vai izkliedēta gaisma no blakus punktiem; lāzera skenēšanas konfokālie mikroskopi izmanto lāzera starus, lai caur apgaismojošiem caurumiem veidotu punktveida gaismas avotus, lai apgaismotu parauga iekšpusi. Katrs fokusa plaknes punkts tiek skenēts, un parauga apgaismotais punkts tiek attēlots noteikšanas caurumā, ko punktu pa punktam vai līniju pa rindiņai uztver fotopavairotāja caurule (PMT) vai aukstā savienojuma ierīce (cCCD), kas atrodas aiz detektēšanas. pinhole, un ir ātri Datora monitora ekrānā veidojas dienasgaismas attēls. Apgaismojuma caurums un noteikšanas adatas caurums ir konjugēti attiecībā pret objektīva lēcas fokusa plakni. Fokālās plaknes punkti ir vienlaikus fokusēti uz apgaismojuma caurumu un emisijas caurumu. Punkti ārpus fokusa plaknes netiks attēloti noteikšanas caurumā. Tas tiek iegūts Konfokālie attēli ir paraugu optiskie šķērsgriezumi, kas novērš izplūdušo attēlu trūkumus parastajos mikroskopos.
3. Pielietojuma jomas: ietver medicīnu, dzīvnieku un augu zinātnisko izpēti, bioķīmiju, bakterioloģiju, šūnu bioloģiju, audu embrioloģiju, pārtikas zinātni, ģenētiku, farmakoloģiju, fizioloģiju, optiku, patoloģiju, botāniku, neirozinātni, jūras bioloģiju un materiālu zinātni, elektronisko zinātni , mehānika, naftas ģeoloģija, mineraloģija.
