Ievads daudzfotonu lāzera skenēšanas mikroskopu priekšrocībās un mīnusos
Daudzfotonu lāzerskenējošā mikroskopa priekšrocības:
1. Sarkanās vai infrasarkanās gaismas ierosinātā gaismas izkliede ir neliela, un mazo daļiņu izkliede ir apgriezti proporcionāla viļņa garuma ceturtajai jaudai.
2. Vairāk izkliedētu fotonu no attēlveidošanas šķērsgriezuma-var savākt bez nepieciešamības izveidot caurumus.
3. Caurumi nevar atšķirt izkliedētos fotonus, kas izstaro no defokusētiem vai fokusa apgabaliem, un daudzfotoniem ir labāka signāla -pret-trokšņu attiecība dziļajā attēlveidošanā.
4. Ultravioleto vai redzamo gaismu, ko izmanto viena fotona ierosināšanai, paraugs viegli absorbē un vājina, pirms stars sasniedz fokusa plakni, tādējādi apgrūtinot dziļu slāņu ierosmi.
5. Attiecībā uz bioloģisko mikroskopisko novērošanu, pirmais apsvērums ir nesabojāt paša organisma aktīvo stāvokli, uzturēt ūdens, jonu koncentrācijas, skābekļa un barības vielu cirkulāciju. Gaismas novērošanas jomā gan siltuma, gan fotonu enerģijai jāpaliek apstarošanas dozas robežās un gaismas enerģijai, kas nebojā šūnas.
6. Daudzfotonu mikroskopijai ir daudz priekšrocību. Trīsdimensiju izšķirtspējas, dziļuma invāzijas, izkliedes efektivitātes, fona gaismas, signāla-pret-trokšņu attiecības, vadības uc izteiksmē ir pazīmes, kas iepriekšējiem lāzera mikroskopiem nepiemīt vai nevar pārspēt.
Daudzfotonu lāzerskenējošā mikroskopa trūkumi:
1. Tikai fluorescences attēlveidošanai.
2. Ja paraugā ir hromofori, kas spēj absorbēt ierosmes gaismu, paraugs var tikt pakļauts termiskiem bojājumiem.
3. Izšķirtspēja ir nedaudz samazināta, lai gan to var uzlabot, vienlaikus izmantojot konfokālos mazos caurumus, ir signāla zudums.
4. Dārgo ultraātro lāzeru ierobežojumu dēļ daudzfotonu skenēšanas mikroskopu izmaksas ir salīdzinoši augstas.
