Fluorescences mikroskopijas principi un struktūras iezīmes
Fluorescences mikroskops ir punktveida gaismas avota augstas gaismas efektivitātes izmantošana, izmantojot krāsu filtrēšanas sistēmu, lai izstarotu noteiktu gaismas viļņa garumu (piemēram, ultravioleto 3650 vai violeti zilu 4200) kā ierosmes gaismu, fluorescējoša materiāla ierosmi. paraugs izstaro dažādas fluorescences krāsas un pēc tam tiek palielināts caur objektīvu un okulāriem novērošanai. Tādā veidā spēcīga kontrasta fonā, pat ja fluorescence ir ļoti vāja, to ir viegli identificēt, augsta jutība, galvenokārt izmanto šūnu struktūras un funkcijas un ķīmiskā sastāva izpētei. Fluorescences mikroskopa pamatstruktūru veido parasts optiskais mikroskops un daži piederumi (piemēram, fluorescences gaismas avots, ierosmes filtri, divkrāsu staru atdalītājs un bloķējošie filtri utt.). Fluorescējošās gaismas avots - parasti tiek izmantota īpaši augsta spiediena dzīvsudraba spuldze (50-200W), kas var izstarot dažādus gaismas viļņu garumus, taču katram fluorescējošajam materiālam ir spēcīgākais fluorescences ierosmes viļņa garums, tāpēc ir jāpievieno ierosmes filtri (parasti ultravioletais, violetais, zilais un zaļais ierosmes filtrs), lai, apstarojot paraugus, tiktu absorbēts tikai noteikts ierosmes gaismas viļņa garums, bet pārējā gaisma tiek absorbēta. Tāpēc ir nepieciešams pievienot ierosmes filtru (parasti ultravioleto, violeto, zilo un zaļo ierosmes filtru), lai tikai noteikts ierosmes gaismas viļņa garums caur paraugu, bet cita gaisma tiktu absorbēta. Kad katra viela tiek apstarota ar ierosmes gaismu, tā ļoti īsā laikā izstaro redzamu fluorescenci ar garāku viļņa garumu nekā apstarotā gaisma. Fluorescencei ir specifiskums, kas parasti ir vājāks nekā ierosmes gaisma, lai varētu novērot specifisko fluorescenci objektīva lēcā aiz nepieciešamības pievienot bloķējošu (vai slāpējošu) filtru.
Tās loma ir divējāda:
Viens no tiem ir absorbēt un bloķēt ierosmes gaismu okulārā, lai netraucētu fluorescenci un acu bojājumus.
Otrais ir izvēlēties un izlaist īpašu fluorescenci, parādot īpašu fluorescējošu krāsu. Divu veidu filtri ir jāizvēlas un jāizmanto kopā.
