Pareiza apgrieztās fluorescences mikroskopa izmantošana
Apgrieztās fluorescences mikroskops ir daudzfunkcionāls mikroskops, ko izmanto augstas klases bioloģiskās zinātnes pētījumu jomā. Tās struktūra ir sarežģīta un dārga. Tāpēc, lai medicīnas absolventi pareizi izprastu apgrieztās fluorescences mikroskopa darbību un lietošanu, skolotājiem vispirms ir jādemonstrē apgrieztās fluorescences mikroskopa faktiskā darbība. Pirms tam tika izveidots kurss, lai apgūtu pamatzināšanas par apgrieztās fluorescences mikroskopiem, iepazīstinot ar invertās fluorescences mikroskopu uzbūvi, principu, darbību un lietošanas pamatmetodēm, un pēc tam konkrētajā darbībā dažādiem paraugiem demonstrēt dažādas funkcijas, sākot no sekla. padziļināt, pakāpeniski Standartizēt apgrieztās fluorescences mikroskopu izmantošanu medicīnas maģistrantiem.
1. Pareiza spilgta lauka novērošanas izmantošana. Viena no apgrieztās fluorescences mikroskopa funkcijām ir spilgta lauka novērošana. Pamatprincips ir tāds, ka pēc tam, kad paraugs ir apstarots ar gaismu, katras daļas gaismas absorbcija ir atšķirīga, lai veiktu attēlu uz spilgta fona. Tas galvenokārt ir piemērots iekrāsotām vai krāsainām šūnām, paraugu, piemēram, audu sekciju, novērošanai.
2. Pareiza fāzes kontrasta novērošanas izmantošana. Otrā apgrieztās fluorescences mikroskopa funkcija ir fāzes kontrasta novērošana. Tās pamatprincips ir dažādu parauga daļu optiskā ceļa atšķirības pārvērst amplitūdas starpībā. Novērošana tiek veikta, izmantojot fāzes kontrasta objektīvu ar fāzes plāksni un kondensatora lēcu ar gredzenveida diafragmu. Tas galvenokārt ir piemērojams dzīvu šūnu vai nekrāsotu audu sekciju novērošanai, eksperimentālās mācīšanas procesā, papildus pareizai medicīnas maģistrantūras studentu vadīšanai ievērot fāzes kontrasta novērošanas pamatdarbības metodes, svarīgāk ir viņus vadīt izprast un apgūt paraugus, ko izmanto fāzes kontrasta novērošanai. Viņiem turpmākajos zinātniskajos pētījumos visbiežāk izmanto kultivēto šūnu mikroskopisko novērošanu. Pirmkārt, šūnu aprīkojuma izvēlei parasti ir ieteicams izmantot stikla un plastmasas kultivēšanas traukus, kultivēšanas šķīvjus un kultivēšanas pudeles. Lielākā daļa no tiem ir bezkrāsaini un caurspīdīgi, un tos var novērot tieši apgrieztā fluorescējošā mikroskopā, neizlejot šūnu šķidrumu un citus apstrādi. Otrkārt, veicot mikroskopisko novērošanu, pēc vēlēšanās neatveriet iekārtas vāku, lai nepiesārņotu šūnas. Visbeidzot, operatoriem ir jāvalkā cimdi, maskas un balti mēteļi, kas var ne tikai aizsargāt viņu veselību, bet arī novērst šūnu inficēšanos.
3. Pareiza fluorescences novērošanas izmantošana. Trešā apgrieztās fluorescences mikroskopa funkcija ir fluorescences novērošana. Pamatprincips ir izmantot ierosmes gaismu, lai ierosinātu paraugu, lai radītu fluorescenci, lai realizētu parauga formas un stāvokļa novērošanu. Tas galvenokārt ir piemērots fluorescējoši marķētu paraugu novērošanai. Fluorescences novērošana ir svarīga apgrieztā fluorescences mikroskopa funkcija, un tā piederumi ir dārgi un īpaši lietojami. Lai medicīnas absolventi pareizi izprastu fluorescences novērošanas darbību un pielietojumu, skolotājiem ir ne tikai jāiemāca pamatdarbības metodes, bet, vēl svarīgāk, jāiemāca apgūt tās īpatnības. Pirmkārt, sagatavojot paraugus priekšmetstikliņu stiklam un vāka stiklam jābūt ar gludu virsmu un atbilstošu biezumu (stikla stiklam jābūt no 0,8 mm līdz 1,2 mm, un vāka stiklam jābūt apmēram { {5}},17 mm); paraugam jābūt ar atbilstošu biezumu un jāizvairās no šūnu pārklāšanās vai piemaisījumu maskēšanas; montāžas vidē jāizmanto vienāda tilpuma glicerīna un karbonāta buferšķīduma maisījums (0,5 mol/L pH9.0-9.5). Otrkārt, pirms fluorescējošās novērošanas telpā ir jāizslēdz elektriskā gaisma un apgrieztā dienasgaismas mikroskopa baltā gaisma, lai nodrošinātu vidi tumšā telpā. Visbeidzot, fluorescences novērošanā novērošanas laiks ir stingri jākontrolē, parasti 1-2 stundas/laiks ir piemērots, pretējā gadījumā fluorescence samazināsies un pazudīs; regulējot gaismas avotu, valkājiet aizsargbrilles, lai izvairītos no ultravioleto staru bojājumiem.
4. Pareiza attēlu uzņemšanas izmantošana. Zinātniskajos pētījumos ir ne tikai nepieciešams, lai apgrieztās fluorescences mikroskops varētu veikt dažādus novērojumus, bet arī nepieciešams, lai apgrieztās fluorescences mikroskops varētu uzņemt attēlu. Apgrieztā fluorescences mikroskopa sistēma apvieno optisko mikroskopu ar datoru, izmantojot fotoelektrisko pārveidi, ne tikai mikroskopiskai novērošanai okulārā, bet arī reāllaika dinamiskai attēla novērošanai, rediģēšanai un saglabāšanai datorā.
