Fluorescences mikroskopa uzbūve un galvenās sastāvdaļas
Fluorescences mikroskopija ir būtisks instruments imūnfluorescējošā citoķīmijā. Tas sastāv no galvenajām sastāvdaļām, piemēram, gaismas avota, filtru plākšņu sistēmas un optiskās sistēmas. Tas ir izmantot noteiktu gaismas viļņa garumu, lai ierosinātu paraugu, lai tas izstaro fluorescenci, un novērot parauga fluorescences attēlu, pastiprinot objektīva lēcu un okulāra sistēmu.
Fluorescences mikroskopa uzbūve un galvenās sastāvdaļas
(1) Gaismas avots
Mūsdienās 200 W īpaši augsta spiediena dzīvsudraba spuldzes bieži izmanto kā gaismas avotus. Tie ir izgatavoti no kvarca stikla, ar sfērisku formu vidū, un iekšpusē ir iepildīts noteikts daudzums dzīvsudraba. Darba laikā izlāde starp diviem elektrodiem izraisa dzīvsudraba iztvaikošanu, un gaisa spiediens bumbiņā strauji paaugstinās. Kad dzīvsudrabs ir pilnībā iztvaikojis, tas var sasniegt 50-70 standarta atmosfēras spiedienu, un šis process parasti aizņem apmēram 5-15 minūtes. Ultraaugstspiediena dzīvsudraba spuldzes luminiscence ir gaismas kvantu emisijas rezultāts dzīvsudraba molekulu nepārtrauktas disociācijas un samazināšanas laikā, izlādējoties starp elektrodiem. Tas izstaro spēcīgu ultravioleto un zili violeto gaismu, kas ir pietiekami daudz dažādu fluorescējošu vielu ierosināšanai, tāpēc to plaši izmanto fluorescences mikroskopijā.
Arī īpaši augsta spiediena dzīvsudraba spuldzes izdala daudz siltuma. Tāpēc lampas mājā jābūt labiem siltuma izkliedes apstākļiem, un darba vides temperatūra nedrīkst būt pārāk augsta.
Jauno īpaši augsta spiediena dzīvsudraba lampu lietošanas sākumā var aizdedzināt bez augsta sprieguma. Pēc lietošanas perioda tas jāiedarbina ar augstu spriegumu (apmēram 15000 V). Pēc palaišanas apkopes darba spriegums parasti ir 50-60V, un darba strāva ir aptuveni 4A. Vidējais 200 W īpaši augstspiediena dzīvsudraba spuldzes kalpošanas laiks ir aptuveni 200 stundas, ja to katru reizi izmanto 2 stundas. Jo īsāks darba laiks, jo īsāks kalpošanas laiks. Ja to lieto tikai 20 minūtes, kalpošanas laiks tiks samazināts par 50 procentiem. Tāpēc, lietojot to, samaziniet palaišanas reižu skaitu. Spuldzes lietošanas laikā tās gaismas jauda pakāpeniski samazinās. Kad gaisma nodziest, pirms restartēšanas pagaidiet, līdz tā atdziest. Neizslēdziet spuldzi uzreiz pēc tās aizdedzināšanas, lai nesabojātu elektrodu nepilnīgas dzīvsudraba iztvaikošanas dēļ. Parasti tam jāgaida 15 minūtes. Ultraaugstspiediena dzīvsudraba spuldzes augstā spiediena un spēcīgo ultravioleto staru dēļ spuldze ir jāievieto lampas kamerā, pirms to var aizdedzināt, lai nesabojātu acis un neizraisītu darbību sprādziena gadījumā. .
Īpaši augsta spiediena dzīvsudraba spuldzes (100 W vai 200 W) gaismas avota ķēde un vairākas daļas, ieskaitot transformatoru, balastu un palaišanu. Lampas kamerā ir spuldzes gaismas centra regulēšanas sistēma. Aiz spuldzes spuldzes ir uzstādīts ar alumīniju pārklāts ieliekts atstarotājs, bet priekšpusē - gaismu savācošs objektīvs.
Vietējai īpaši augsta spiediena dzīvsudraba spuldzei GCQ-200 ir laba veiktspēja, un ar to var aizstāt importētās spuldzes, piemēram, HBO-200. Vidējais kalpošanas laiks ir vairāk nekā 200h, un cena ir salīdzinoši zema.
Vienkārša un pārnēsājama augstas krāsu temperatūras broma volframa dienasgaismas avota ierīce, kas izstrādāta manā valstī, ir maza izmēra, viegla, mazjaudas, maiņstrāvas un līdzstrāvas divējāda lietojuma (ar līdzstrāvas barošanas avotu), viegli pārnēsājama, viegli lietojama un tai ir. popularizēts un pielietots.
(2) Krāsu filtru sistēma
Krāsu filtru sistēma ir svarīga fluorescences mikroskopa sastāvdaļa, kas sastāv no ierosmes filtra plāksnes un presēšanas filtra plāksnes. Filtra plāksnes modelis un katra ražotāja nosaukums bieži vien nav vienāds. Filtra plāksnes parasti ir nosauktas pēc pamatkrāsas, burti priekšā apzīmē krāsu, burti aizmugurē apzīmē stiklu un cipari apzīmē modeļa īpašības. olimpa mikroskops
(3) Objektīva lēca
Var izmantot dažādas objektīvu lēcas, bet tiek izmantotas ahromatiskās objektīvas, jo to autofluorescence ir minimāla un to gaismas caurlaidības īpašības (viļņu garuma diapazons) ir piemērotas fluorescencei. Tā kā attēla fluorescences spilgtums mikroskopa redzes laukā ir proporcionāls objektīva apertūras attiecības kvadrātam un apgriezti proporcionāls tā palielinājumam, lai uzlabotu fluorescences attēla spilgtumu, objektīvs ar lielu jāizmanto diafragmas atvēruma attiecība. Īpaši lielā palielinājumā tā ietekme ir ļoti acīmredzama. Tāpēc paraugiem ar nepietiekamu fluorescenci ir jāizmanto objektīvs ar lielu apertūras attiecību ar pēc iespējas zemāku okulāru (4×, 5×, 6,3× utt.).
(4) Spogulis
Atstarotāja atstarojošais slānis parasti ir pārklāts ar alumīniju, jo alumīnijs mazāk absorbē ultravioletās gaismas un redzamās gaismas zili violetajā reģionā, un atstarojums ir vairāk nekā 90 procenti, savukārt sudraba atstarojums ir tikai 70 procenti. Parasti izmanto plakanu atstarotāju.
(5) Kondensators
Fluorescences mikroskopijai paredzētie kondensatori ir izgatavoti no kvarca stikla vai cita UV starojuma caurspīdīga stikla. Ir divu veidu skaidrā lauka kondensatori un tumšā lauka kondensatori. Ir arī fāzes kontrasta fluorescences koncentratori.
(6) Epi-light ierīce
Jaunā tipa epi-gaismas ierīce ir tāda, ka pēc tam, kad gaismas avota gaisma nonāk traucējumu spektroskopiskajā filtrā, īsa viļņa garuma daļa (ultravioletā un purpura zilā) tiek atspoguļota filtra pārklājuma īpašību dēļ. Kad filtrs ir vērsts pret gaismas avotu, leņķis ir 45. Kad tas ir sasvērts, tas šauj uz objektīva lēcu vertikāli un šauj uz paraugu caur objektīvu, lai paraugs būtu satraukts. Šajā laikā objektīva lēca tieši darbojas kā gaismas savācējs. Tajā pašā laikā filtra garā daļa (zaļa, dzeltena, sarkana utt.) ir caurspīdīga filtram, tāpēc tā neatspīd objektīva lēcas virzienā, un filtrs darbojas kā ierosmes filtra plāksne, tā kā parauga fluorescence atrodas redzamās gaismas garā viļņa garumā, var iziet cauri filtram un sasniegt okulāru novērošanai, fluorescējošā attēla spilgtums palielinās, palielinoties palielinājumam, un ir spēcīgāks par caurlaidīgo gaismu. avots ar lielu palielinājumu. Papildus pārraides gaismas avota funkcijai tas ir vairāk piemērots tiešai necaurspīdīgu un caurspīdīgu paraugu, piemēram, biezu šķēlumu, filtru membrānu, koloniju un audu kultūras paraugu novērošanai. Jaunajos pēdējos gados izstrādātajos fluorescences mikroskopos pārsvarā tiek izmantotas epi-gaismas ierīces, kuras sauc par epifluorescences mikroskopiem.
