Pareiza apgrieztās fluorescences mikroskopijas izmantošana
Apgrieztās fluorescences mikroskops ir daudzfunkcionāls mikroskops, ko izmanto augstas klases bioloģiskās zinātnes pētījumu jomā. Tās struktūra ir sarežģīta un dārga. Tāpēc, lai medicīnas absolventi pareizi apgūtu apgrieztās fluorescences mikroskopa darbības un lietošanas standartus, skolotājiem vispirms ir jāiemāca pamatzināšanas par apgrieztās fluorescences mikroskopu, pirms viņi demonstrē apgrieztās fluorescences mikroskopa faktisko darbību. Viņiem jāiepazīstina ar apgrieztās fluorescences mikroskopa uzbūvi, principu, funkcijām un lietošanas pamatmetodēm un pēc tam jādemonstrē dažādas funkcijas dažādiem paraugiem konkrētās lietošanas operācijās, pakāpeniski standartizējot apgrieztās fluorescences mikroskopa darbību un lietošanu medicīnas maģistrantiem.
1. Pareiza vizuālā novērošanas izmantošana. Viena no apgrieztā fluorescences mikroskopa funkcijām ir novērot spilgtā redzes laukā. Tās pamatprincips ir panākt attēlveidošanu spilgtā fonā, pamatojoties uz katras parauga daļas atšķirīgo gaismas absorbciju pēc tam, kad tā ir apgaismota ar gaismu. Tas galvenokārt ir piemērots krāsotu vai krāsainu šūnu, audu šķēlumu un citu paraugu novērošanai.
2. Pareiza diferenciālās novērošanas izmantošana. Otrā apgrieztās fluorescences mikroskopa funkcija ir fāzu atšķirību novērošana. Tās pamatprincips ir pārveidot dažādu parauga daļu optiskā ceļa atšķirību amplitūdas starpībā un novērot caur fāzes starpības objektīvu ar fāzes plāksni un prožektoru ar apļveida apertūru. Tas galvenokārt ir piemērots dzīvu šūnu vai nekrāsotu audu šķēlumu novērošanai. Eksperimentālās mācīšanas procesā papildus pareizai medicīnas maģistrantūras studentu vadīšanai ievērot fāzu atšķirību novērošanas pamatdarbības metodes, svarīgāk ir viņus virzīt saprast un apgūt paraugus, izmantojot fāzu atšķirību novērošanu. Viņiem turpmākajos zinātniskajos pētījumos visbiežāk izmantotā metode ir kultivēto šūnu mikroskopiskā novērošana. Pirmkārt, šūnu aprīkojuma izvēlei parasti ir ieteicams izmantot kultivēšanas traukus, šķīvjus un pudeles, kas izgatavotas no stikla un plastmasas materiāliem. Tie galvenokārt ir bezkrāsaini un caurspīdīgi, un tos var tieši novērot apgrieztā fluorescences mikroskopā bez nepieciešamības izliet šūnu šķidrumu vai veikt citas apstrādes. Otrkārt, veicot mikroskopisku novērošanu, nejauši neatveriet iekārtas vāku, lai izvairītos no šūnu piesārņošanas. Visbeidzot, operatoriem ir jāvalkā cimdi, maskas un balti mēteļi, lai ne tikai aizsargātu savu veselību, bet arī novērstu šūnu inficēšanos.
3. Pareiza fluorescences novērošanas izmantošana. Trešā apgrieztā fluorescences mikroskopa funkcija ir fluorescences novērošana. Tās pamatprincips ir izmantot ierosmes gaismu, lai ierosinātu paraugu, lai radītu fluorescenci, tādējādi panākot parauga formas un novietojuma novērošanu. Tas galvenokārt ir piemērots fluorescences marķētu paraugu novērošanai. Fluorescences novērošana ir svarīga apgrieztās fluorescences mikroskopijas funkcija ar dārgiem piederumiem un īpašu pielietojumu. Lai medicīnas absolventi pareizi apgūtu fluorescences novērošanas darbības normas, skolotāji viņiem ne tikai iemāca pamata darbības metodes, bet, vēl svarīgāk, iemāca viņiem tās unikalitāti. Pirmkārt, paraugu sagatavošanā priekšmetstikliņa un vāka stikla virsmai jābūt gludai un atbilstošam biezumam (slaidam jābūt no 0,8 mm līdz 1,2 mm, un vāka stiklam jābūt apmēram {{5). }}.17mm); Paraugam jābūt atbilstošam biezumam, vienlaikus izvairoties no šūnu pārklāšanās vai piemaisījumu maskēšanas; Blīvējošajam līdzeklim jāizmanto vienāds glicerīna un karbonāta buferšķīduma maisījums (0,5 mol/L pH 9.0-9.5). Otrkārt, pirms fluorescences novērošanas telpā ir jāizslēdz apgaismojums un apgrieztā fluorescences mikroskopa baltā gaisma, lai nodrošinātu, ka tie atrodas tumšā telpā. Visbeidzot, novērojot fluorescenci, novērošanas laiks ir stingri jākontrolē, parasti 1-2 stundas laikā, pretējā gadījumā fluorescence samazināsies un pazudīs; Regulējot gaismas avotu, jāvalkā aizsargbrilles, lai izvairītos no briļļu UV bojājumiem.
4. Pareiza attēlu uzņemšanas izmantošana. Zinātniskajos pētījumos ir nepieciešams ne tikai tas, ka ar apgrieztās fluorescences mikroskopiju var iegūt vairākus novērojumus, bet arī, lai ar apgrieztās fluorescences mikroskopiju varētu iegūt attēlu. Apgrieztā fluorescences mikroskopa sistēma apvieno optisko mikroskopu ar datoru, izmantojot fotoelektrisko pārveidošanu, ļaujot ne tikai veikt mikroskopisku novērošanu okulārā, bet arī reāllaika dinamisko attēlu novērošanu, rediģēšanu un glabāšanu datorā.
