Fluorescences mikroskopa pamati un strukturālie elementi
Fluorescences mikroskopijā izmanto punktu ar augstu gaismas efektivitāti, lai caur filtru sistēmu izstarotu gaismu ar noteiktu viļņa garumu (piemēram, ultravioleto gaismu 3650 collu vai purpursarkanā zilā gaisma 4200 collas) kā ierosmes gaismu, lai ierosinātu paraugā esošās fluorescējošās vielas, lai izstarotu fluorescenci. dažādas krāsas Pēc tam novērojiet, izmantojot objektīva un okulāra palielinājumu. Tādā veidā zem spēcīga kontrasta fona, pat ja fluorescence ir ļoti vāja, to ir viegli identificēt un tam ir augsta jutība. To galvenokārt izmanto šūnu struktūras un funkcijas un ķīmiskā sastāva izpētei. Fluorescences mikroskopa pamatstruktūru veido parasts optiskais mikroskops un daži piederumi (piemēram, dienasgaismas gaismas avots, ierosmes filtrs, divu krāsu staru sadalītājs un bloķējošs filtrs utt.). Fluorescējošas gaismas avots — parasti izmanto īpaši augsta spiediena dzīvsudraba lampu (50-200W), kas var izstarot dažāda viļņa garuma gaismu, taču katrai fluorescējošai vielai ir ierosmes viļņa garums, kas rada visspēcīgāko fluorescenci, tāpēc ierosmes filtrs (parasti ir ultravioletie, purpursarkanie, zilie un zaļie ierosmes filtri), kas ļauj tikai noteikta viļņa garuma ierosmes gaismai iziet cauri un apstarot paraugu, vienlaikus absorbējot citu gaismu. Pēc tam, kad katra viela ir apstarota ar ierosmes gaismu, tā ļoti īsā laikā izstaro redzamu fluorescenci ar garāku viļņa garumu nekā apstarošanas viļņa garums. Fluorescence ir specifiska un parasti vājāka nekā ierosmes gaisma. Lai novērotu specifisku fluorescenci, aiz objektīva ir jāpievieno bloķēšana (vai slāpēšana) un jāizmanto kopā ar to.
Atšķirība starp fluorescences mikroskopu un parasto mikroskopu
1. Apgaismošanas metode parasti ir episkopiska, tas ir, gaismas avots tiek projicēts uz parauga caur objektīva lēcu;
2. Gaismas avots ir ultravioletā gaisma, viļņa garums ir īsāks un izšķirtspēja ir augstāka nekā parastajiem mikroskopiem;
3. Ir divi speciāli filtri, viens gaismas avota priekšā tiek izmantots, lai filtrētu redzamo gaismu, un tas, kas atrodas starp okulāru un objektīvu, tiek izmantots ultravioleto staru filtrēšanai, lai aizsargātu cilvēka aci.
Fluorescences mikroskops ir arī sava veida optiskais mikroskops, galvenā atšķirība ir tā, ka abu ierosmes viļņa garums ir atšķirīgs. Tas nosaka atšķirību starp fluorescences mikroskopu un parasto optisko mikroskopu struktūras un lietojuma ziņā.
Fluorescences mikroskopija ir būtisks instruments imūnfluorescējošā citoķīmijā. Tas sastāv no galvenajām sastāvdaļām, piemēram, gaismas avota, filtru plākšņu sistēmas un optiskās sistēmas. Tas ir izmantot noteiktu gaismas viļņa garumu, lai ierosinātu paraugu, lai tas izstaro fluorescenci, un novērot parauga fluorescences attēlu, pastiprinot objektīvu un okulāra sistēmu.
