Fluorescences mikroskopijas princips un struktūras īpašības
Fluorescences mikroskopija izmanto punktu ar augstu gaismas efektivitāti, lai izstarotu noteiktu gaismas viļņa garumu (piemēram, ultravioleto gaismu 3650 collu vai violeti zilu gaismu 4200 collas) caur krāsu filtrēšanas sistēmu kā ierosmes gaismu, un ierosina paraugā esošās fluorescējošās vielas, lai izstarotu dažādus. fluorescences krāsas. Pēc tam to novēro, palielinot objektīvu un okulāru. Tādā veidā to ir viegli atpazīt pat tad, ja fluorescence ir ļoti vāja uz spēcīga fona un ar augstu jutību. To galvenokārt izmanto šūnu struktūras un funkciju, kā arī ķīmiskā sastāva izpētei. Fluorescences mikroskopa pamatstruktūru veido parasts optiskais mikroskops un piederumi, piemēram, fluorescējošas gaismas avots, ierosmes filtrs, dihromiskā stara separators un bloķējošais filtrs. Luminiscences gaismas avotos parasti tiek izmantotas īpaši augsta spiediena dzīvsudraba spuldzes (50-200W), kas var izstarot dažāda viļņa garuma gaismu. Tomēr katrai fluorescējošai vielai ir ierosmes gaismas viļņa garums, kas rada visspēcīgāko fluorescenci, tāpēc ir jāpievieno ierosmes filtri (parasti ultravioletie, purpursarkanie, zilie un zaļie ierosmes filtri), lai tikai noteikta viļņa garuma ierosmes gaisma varētu iekļūt un apstarot paraugs, vienlaikus absorbējot visu pārējo gaismu. Pēc apstarošanas ar ierosmes gaismu katra viela ļoti īsā laikā izstaro redzamu fluorescenci, kas ir ilgāka par apstarošanas viļņa garumu. Fluorescencei ir specifiskums, un tā parasti ir vājāka nekā ierosmes gaisma. Lai novērotu specifisku fluorescenci, aiz objektīva ir jāpievieno bloķēšana (vai slāpēšana) un jāizmanto to kombinācijā.
Atšķirība starp fluorescences mikroskopu un parasto mikroskopu
1. Apgaismošanas metode parasti ir krītošā stara veids, kurā gaismas avots tiek projicēts uz paraugu caur objektīvu;
2. Gaismas avots ir ultravioletā gaisma ar īsāku viļņa garumu un augstāku izšķirtspēju nekā parastiem mikroskopiem;
3.Ir divi īpaši filtri, viens gaismas avota priekšā tiek izmantots, lai filtrētu redzamo gaismu, un tas, kas atrodas starp okulāru un objektīvu, tiek izmantots ultravioleto staru filtrēšanai, lai aizsargātu cilvēka aci.
Fluorescences mikroskopija ir arī optiskās mikroskopijas veids, un galvenā atšķirība ir dažādi ierosmes viļņu garumi. Tas nosaka struktūras un lietojuma atšķirības starp fluorescējošu mikroskopiju un parasto optisko mikroskopiju.
Fluorescences mikroskopija ir pamata instruments imunofluorescences citoķīmijai. Tas sastāv no galvenajām sastāvdaļām, piemēram, gaismas avota, filtra plākšņu sistēmas un optiskās sistēmas. Tas izmanto noteiktu gaismas viļņa garumu, lai ierosinātu paraugu un izstaro fluorescenci, un palielina to caur objektīvu un okulāru sistēmu, lai novērotu parauga fluorescences attēlu.
