Fluorescences mikroskopa īpašā struktūra ietver:
(I) Krāsu filtru sistēma
Krāsu filtrs ir svarīga fluorescences mikroskopa sastāvdaļa, tā galvenās sastāvdaļas ir ierosmes gaismas filtrs (pirmais barjeras filtrs), emisijas gaismas filtrs (otrais barjeras filtrs) un daļēji caurspīdīgs un daļēji pretfiltrs (staru sadalošais spogulis) . Dažādu ražotāju krāsu filtru modeļi, nosaukums bieži vien nav vienots.
1. Ierosmes gaismas filtrs un emisijas gaismas filtrs: atkarībā no gaismas avota un fluorohroma īpašībām parasti izvēlieties šādus trīs saskaņošanas veidus, lai nodrošinātu noteiktu ierosmes gaismas viļņa garuma diapazonu un paraugam ierosinātu fluorescenci. okulārs attēlveidošanai.
UV ierosme: ierosmes gaismas filtrs ļauj pārraidīt UV gaismu un bloķē redzamās gaismas pāreju virs 400 nm. Atbilstošais emisijas filtrs ļauj iziet cauri zilai gaismai, kas redzamības laukā parādās zilā krāsā, piemēram, DAPI krāsošanai.
Zilās gaismas ierosme: ierosmes gaismas filtrs ļauj zilajai gaismai iziet cauri, bloķējot citus gaismas viļņu garumus. Atbilstošais emisijas filtrs ļauj iziet zaļo gaismu, piemēram, GFP krāsošanas marķieriem.
Zaļā ierosme: ierosmes filtrs ļauj iziet cauri zaļajai gaismai, bloķējot citus viļņu garumus. Atbilstošais emisijas filtrs parasti ļauj iziet cauri sarkanai gaismai, piemēram, krāsojot rodamīnu.
2. Daļēji caurspīdīgs un daļēji atstarojošs filtrs: tā uzdevums ir pilnībā bloķēt gaismas ierosmi caur atstarošanu; un caur atbilstošo izstarotās gaismas viļņa garuma diapazonu. Tā modelis un gaismas filtru ierosme un gaismas filtru emisija atbilst.
(B) objektīva lēca un okulārs
Var uzlikt dažādas objektīva lēcas, bet * laba izvēle simetriskas, ahromatiskas objektīva lēcas, jo tās autofluorescence ir ļoti maza un gaismas caurlaidības īpašības (viļņu garuma diapazons) piemērotas fluorescencei. Tā kā attēla fluorescences spilgtums mikroskopa redzes laukā ir proporcionāls objektīva purna ātruma kvadrātam un apgriezti proporcionāls tā palielinājumam, tāpēc, lai uzlabotu fluorescences attēla spilgtumu, objektīvam ar lielu purna frekvenci vajadzētu izmantot. Īpaši attiecībā uz fluorescenci, kas nav pietiekami spēcīga paraugiem, vajadzētu izmantot lielu mutes ātrumu, augstu gaismas caurlaidības objektīvu, ar pēc iespējas zemāku okulāru.
C) citas optiskās ierīces
Atstarotājs, tā atstarojošais slānis pārsvarā ir pārklāts ar alumīniju, jo alumīnijs ultravioletajā un redzamajā gaismā absorbē zili-violeto apgabalu mazāk, atstarojot līdz 90% vai vairāk (kamēr sudraba atstarošanās spēja ir tikai 70%). Parasti tiek izmantoti plakanie atstarotāji. Prožektoru spogulis, kas īpaši izstrādāts un ražots fluorescences mikroskopijas prožektoru spogulis izgatavots no kvarca stikla vai cita UV caurspīdīga stikla. Krītošās gaismas ierīce, kas papildus pārraidītās gaismas avota funkcijai ir vairāk piemērota necaurspīdīgiem un caurspīdīgiem paraugiem, piemēram, biezai plēvei, filtra membrānai, kolonijai, audu kultūrai un citiem paraugiem tiešai novērošanai. Pēdējos gados ir izstrādāts jauna veida fluorescences mikroskops, izmantojot krītošās gaismas ierīci, ko sauc par krītošās fluorescences mikroskopu.
(D) gaismas avots
Mūsdienās kā gaismas avots tiek izmantota 50 vai 100 W augstspiediena dzīvsudraba spuldze. Divu elektrodu izlādes darbība, ko izraisa dzīvsudraba iztvaikošana, gaisa spiediena lode strauji paaugstinās (šis process parasti aizņem apmēram 5–15 minūtes), un gaismas kvantu emisijas procesā izdalītās gaismas viļņa garums ir pietiekams, lai ierosinātu. visu veidu fluorescējošās vielas, tāpēc fluorescences mikroskopijai parasti tiek izmantota.
Dzīvsudraba spuldžu kalpošanas laiks ir salīdzinoši īss, parasti 200 stundas, un, reaģējot uz šo kalpošanas laika ierobežojumu, pēdējos gados ir plaši izmantots jauns dienasgaismas gaismas avots X-Cite, jo lampas kalpošanas laiks ir 2000 stundas un tā ir elastīga. - nav nepieciešama iepriekšēja uzsildīšana, un tas ir gatavs lietošanai uzreiz no kastes.
