Kāda ir atšķirība starp fluorescences un lāzera konfokālo mikroskopiju?
fluorescences mikroskops
1. Fluorescences mikroskops ir ierīce, kas izmanto ultravioleto gaismu kā gaismas avotu, lai izgaismotu pārbaudāmo objektu, izraisot tā fluorescenci, un pēc tam novērot objekta formu un stāvokli zem mikroskopa. Fluorescences mikroskopiju izmanto, lai pētītu vielu absorbciju, transportēšanu, izplatību un lokalizāciju šūnās. Dažas vielas šūnās, piemēram, hlorofils, pēc ultravioletā starojuma iedarbības var izstarot fluorescenci; Dažas vielas pašas var neizstarot fluorescenci, bet, ja tās ir iekrāsotas ar fluorescējošām krāsvielām vai fluorescējošām antivielām, tās var izstarot arī fluorescenci ultravioletā starojuma ietekmē. Fluorescences mikroskopija ir viens no instrumentiem šo vielu kvalitatīvai un kvantitatīvai izpētei.
2. Fluorescences mikroskopa princips:
(A) Gaismas avots: gaismas avots izstaro dažāda viļņa garuma gaismu (no ultravioletā līdz infrasarkanajam).
(B) ierosmes filtra gaismas avots: raida noteikta viļņa garuma gaismu, kas var radīt paraugā fluorescenci, vienlaikus bloķējot ierosmes fluorescencei nederīgo gaismu.
(C) Fluorescējoši paraugi: parasti iekrāso ar fluorescējošiem pigmentiem.
(D) Bloķējošs filtrs: selektīvi pārraida fluorescenci, bloķējot ierosmes gaismu, ko paraugs nav absorbējis, un daži viļņu garumi tiek arī selektīvi pārraidīti fluorescencē. Mikroskops, kas izmanto ultravioleto gaismu kā gaismas avotu, lai izstarotu fluorescenci no apstarotā objekta. Elektronu mikroskopu pirmo reizi samontēja Knors un Harroska Berlīnē, Vācijā 1931. gadā. Šāda veida mikroskopā gaismas stara vietā tiek izmantots ātrgaitas elektronu stars. Tā kā elektronu plūsmas viļņa garums ir daudz īsāks salīdzinājumā ar gaismas viļņiem, elektronu mikroskopa palielinājums var sasniegt 800000 reižu ar minimālo izšķirtspējas robežu 0,2 nanometri. Skenējošais elektronu mikroskops, ko sāka izmantot 1963. gadā, ļauj cilvēkiem redzēt sīkās struktūras uz objektu virsmas.
3. Pielietojuma joma: izmanto, lai palielinātu mazu objektu attēlus. Parasti izmanto bioloģijas, medicīnas, mikroskopisko daļiņu utt. novērošanai.
konfokālais mikroskops
1. Konfokālais mikroskops atstarotās gaismas ceļam pievieno daļēji atstarojošu lēcu, kas atstaroto gaismu, kas jau ir izgājusi cauri objektīvam, saliek citos virzienos. Tā fokusa punktā ir deflektors ar adatas caurumu, un mazais caurums atrodas fokusa punktā. Aiz deflektora ir fotopavairotāja caurule. Var iedomāties, ka atstarotā gaisma pirms un pēc noteikšanas gaismas fokusa punkta nevar tikt fokusēta uz mazo caurumu caur šo konfokālo sistēmu, un to bloķēs deflektors. Tātad fotometrs mēra atstarotās gaismas intensitāti fokusa punktā.
2. Princips: tradicionālajos optiskajos mikroskopos tiek izmantoti lauka gaismas avoti, un katra parauga punkta attēlu ietekmēs difrakcija vai izkliedēta gaisma no blakus punktiem; Lāzera skenēšanas konfokālais mikroskops izmanto lāzera staru, lai izveidotu punktveida gaismas avotu caur apgaismotu caurumu, lai skenētu katru punktu parauga fokusa plaknē. Parauga apgaismotais punkts tiek attēlots noteikšanas caurumā, un pēc noteikšanas cauruma to punktu pa punktam vai līnijai uztver fotopavairotāja caurule (PMT) vai termoelektriskā savienojuma ierīce (cCCD), ātri veidojot fluorescējošu attēlu datora monitorā. ekrāns. Apgaismojuma caurums un noteikšanas adatas caurums ir konjugēti attiecībā pret objektīva fokusa plakni. Punkti fokusa plaknē vienlaikus tiek fokusēti uz apgaismojuma caurumu un emisijas caurumu, un punkti ārpus fokusa plaknes netiks attēloti noteikšanas caurumā. Tā rezultātā tiek iegūts konfokāls attēls, kas attēlo parauga optisko šķērsgriezumu, novēršot izplūdušo attēlu trūkumu parastajā mikroskopijā.
3. Pielietojuma jomas: ietver medicīnu, dzīvnieku un augu pētniecību, bioķīmiju, bakterioloģiju, šūnu bioloģiju, audus un embrijus, pārtikas zinātni, ģenētiku, farmakoloģiju, fizioloģiju, optiku, patoloģiju, botāniku, neirozinātni, jūras bioloģiju, materiālu zinātni, elektronisko zinātni, mehānika, naftas ģeoloģija un mineraloģija.
