Kāpēc jums ir jāizmanto konfokālais mikroskops?
1. Optiskie mikroskopi ir sasnieguši pilnības stāvokli, pateicoties mūsu lielo priekšgājēju pūlēm un uzlabojumiem. Faktiski parastie mikroskopi var sniegt mums skaistus mikroskopiskus attēlus vienkārši un ātri. Tomēr notika notikums, kas ienesa revolucionārus jauninājumus šajā gandrīz ideālajā mikroskopijas pasaulē. Tas bija "lāzerskenējošā konfokālā mikroskopa" izgudrojums. Šī jaunā tipa mikroskopa īpašība ir tāda, ka tajā tiek izmantota optiskā sistēma, kas attēla informāciju iegūst tikai uz tās virsmas, kur fokusēts, un, mainot fokusu, atjauno iegūto informāciju attēla atmiņā, tādējādi iegūstot pilnīgu 3D informāciju. Spilgts intelekta tēls. Izmantojot šo metodi, var viegli iegūt informāciju par virsmas formu, ko nevar apstiprināt ar parasto mikroskopu. Turklāt parastajiem optiskajiem mikroskopiem "izšķirtspējas palielināšana" un "fokusa dziļuma palielināšana" ir pretrunīgi apstākļi, īpaši pie liela palielinājuma. Tomēr konfokālajā mikroskopijā šī problēma ir viegli atrisināma.
2. Konfokālās optiskās sistēmas priekšrocības
Konfokālā optiskā sistēma veic parauga punktveida apgaismojumu, un atstarotā gaisma arī izmanto punkta receptoru, lai uztvertu gaismu. Kad paraugs ir novietots fokusa pozīcijā, gandrīz visa atstarotā gaisma var sasniegt fotoreceptoru. Kad paraugs ir ārpus fokusa, atstarotā gaisma nevar sasniegt fotoreceptoru. Citiem vārdiem sakot, konfokālajā optiskajā sistēmā tiks izvadīts tikai attēls, kas sakrīt ar fokusu, un gaismas plankumi un bezjēdzīgi izkliedētā gaisma tiks ekranēti.
3. Kāpēc izmantot lāzeru?
Konfokālajā optiskajā sistēmā paraugs tiek apgaismots punktā, un atstarotā gaisma tiek uztverta arī, izmantojot punktveida fotoreceptoru. Tāpēc ir nepieciešami punktveida gaismas avoti. Lāzeri ir ļoti punktveida gaismas avoti. Vairumā gadījumu konfokālo mikroskopu gaismas avots izmanto lāzera gaismas avotus. Turklāt lāzera īpašības, piemēram, monohromatiskums, virzība un izcila stara forma, arī ir svarīgi iemesli tā plašajai ieviešanai.
4. Kļūst iespējama novērošana reāllaikā, pamatojoties uz ātrgaitas skenēšanu
Lāzerskenēšanai tiek izmantots akustiskais optiskais deflektors (AO elements) horizontālā virzienā un servo elektriski vadāms staru skenēšanas spogulis (Servo Galvano-spogulis) vertikālā virzienā. Tā kā akustiski-optiskajam novirzes blokam nav mehāniskas vibrācijas daļas, tas var skenēt lielā ātrumā, nodrošinot reāllaika novērošanu uzraudzības ekrānā. Šāda veida attēlveidošanas lielais ātrums ir ļoti svarīgs elements, kas tieši ietekmē fokusēšanas un pozīcijas izgūšanas ātrumu.
5. Attiecība starp fokusa pozīciju un spilgtumu
Konfokālajā optiskajā sistēmā spilgtums ir maksimāls, ja paraugs ir pareizi novietots fokusa pozīcijā, un tā spilgtums strauji samazināsies priekšā un aiz tā (nepārtraukta līnija 4. attēlā). Šī fokusa plaknes jutīgā selektivitāte ir arī konfokālā mikroskopa augstuma virziena noteikšanas un fokusa dziļuma paplašināšanas princips. Turpretim parastajam optiskajam mikroskopam nav acīmredzamu spilgtuma izmaiņu pirms un pēc fokusa pozīcijas (punktēta līnija 4. attēlā).
6. Augsts kontrasts un augsta izšķirtspēja
Parastos optiskajos mikroskopos atstarotā gaisma no nefokusa daļas traucēs un pārklājas ar fokusa attēlveidošanas daļu, kā rezultātā samazinās attēla kontrasts. Turpretim konfokālajā optiskajā sistēmā izkliedētā gaisma ārpus fokusa un izkliedētā gaisma objektīva iekšpusē tiek gandrīz pilnībā noņemta, tādējādi var iegūt attēlu ar ļoti augstu kontrastu. Turklāt, tā kā gaisma divas reizes iziet cauri objektīvam, punktveida attēls ir asāks, kas arī uzlabo mikroskopa izšķirtspēju.
