Gaismas mikroskopa attēlveidošanas optiskā ceļa sistēmas regulēšana un mikroskopiskās izmeklēšanas izklāsts
Attēlveidošanas optiskā ceļa sistēmas pielāgošana un mikroskopiskās izmeklēšanas kontūra
Mikroskopa attēlveidošanas optiskās sistēmas regulēšana tiek veikta atbilstoši dažādu mikroskopijas metožu vajadzībām. Tā sauktā mikroskopija, īsumā, ir apgaismojuma metode, ko izmanto, novērojot paraugu caur mikroskopu, un tehnika un metode, kā iegūt labāku kontrastu parauga veidotajā attēlā. Tālāk īsumā aprakstīta mikroskopija, kas ir nogatavināta vairākās metodēs un atbilstošā mikroskopa attēlveidošanas optiskās sistēmas regulēšanas metode.
1. Transmisijas gaišais lauks:
Šī ir tradicionālākā un visizplatītākā pielietošanas metode kopš mikroskopa izgudrošanas. Pamatkomponenti: a. Objektīva lēca: jebkuru objektīvu var izmantot spilgta lauka novērošanai; b. Tēmeklis: var izmantot visu veidu tālskatus, vēlams aprīkotus ar diafragmu ar diafragmu. Regulēšanas metode: pēc tam, kad iepriekš minētā mikroskopa Kuhler apgaismojuma sistēma ir noregulēta, var izmantot spilgtā lauka metodi. Pielietojuma joma: visas iekrāsotās audu daļas, asins uztriepes utt. Piesardzības pasākumi: a. Izmantojot novērošanas spilgtā lauka metodi, Kuhler apgaismojuma sistēma ir jāpielāgo; b. Skata lauka diafragmu nedrīkst patvaļīgi atvērt, un kondensatora spoguļa priekšējais objektīvs ir jānovieto attiecīgi ārā un optiskajā ceļā, ja tiek izmantotas objektīva lēcas 10×, mazāk par 10× un vairāk par 10. ×; c. Kondensatora spoguļa diafragmu nedrīkst izmantot, lai regulētu redzes lauka spilgtumu, un kondensatora spoguļa augstumu nevajadzētu regulēt bez izšķirības, pretējā gadījumā tiks pazemināta mikroskopa izšķirtspēja un krāsoto audu izšķirtspēja. tiks bojāts. mikroskopa un bojājumu izšķirtspēja ir pielāgota Kuhler apgaismojuma sistēmai; d. mikrogrāfijām, katru reizi mainot objektīva palielinājuma lietojumu, jums ir jāpielāgo kondensatora objektīva diafragmas diafragma tā, lai tās izmērs būtu precīzi vienāds ar objektīva objektīvā izmantoto skaitlisko diafragmu 2/3.
2. Raidītās gaismas fāzes kontrasta metode:
Šī ir moderna kontrasta uzlabošanas metodes pārbaude ar mikroskopu. Pamata komponenti: fāzes kontrasta objektīvs, spilgts redzes lauks un fāzes kontrasta daudzfunkcionāls tālvadības tēmelis, fokusēšanas teleskops, zaļie filtri.
Pielāgošanas metodes:
a. Pamatojoties uz Kuhler apgaismojuma sistēmas regulēšanu, skaidri fokusējiet paraugu, izmantojot spilgtā lauka metodi
b. Pagrieziet mērķēšanas tvērumu uz Ph1, lai izlīdzinātu skalas pozīciju, izvēlieties 10 × fāzes kontrasta objektīvu un nomainiet caurspīdīgo paraugu, kas jānovēro.
c. Atvienojiet vienu no okulāriem, nomainiet to ar centrētu teleskopu un fokusējieties uz diviem fāzes kontrasta gredzeniem redzes laukā (objektīva objektīva melnās fāzes kontrasta gredzens un kondensatora lēcas gaismas caurlaidības fāzes kontrasta gredzens).
d. Divi fāzu kontrasta gredzeni redzes laukā var ne vienmēr sakrist, noregulējiet abas tālskata regulēšanas ierīces (regulējiet fāzes kontrasta gredzena regulēšanas sviras kreiso un labo stāvokli un noregulējiet berzes pogas priekšējo un aizmugurējo stāvokli) , lai gaismas caurlaidības gredzens priekšpusē un aizmugurē pa labi un pa kreisi sakristu ar melno gredzenu
e. Pēc regulēšanas nomainiet atpakaļ uz okulāru novērošanai un nospiediet zaļo filtru optiskajā ceļā, lai novērotu parauga fāzes kontrasta attēlu.
f. Ja novērošanai ir 20× un 40× objektīvi, smērēšanas lēca jāiestata Ph2 pozīcijā, bet, izmantojot 100 objektīvus, mērķlēcas jāiestata Ph3 pozīcijā.
Pielietojuma joma: Tas ir piemērots caurspīdīgu, nekrāsotu vai nekrāsotu paraugu, piemēram, visu veidu šūnu, dzīvo audu, nekrāsotu vai nekrāsotu audu daļu, ūdens organismu un tā tālāk novērošanai.
3. Diferenciālo traucējumu fāzes kontrasta metode:
Lai pārvarētu fāzes kontrasta metodi parauga detaļu novērošanai ap attēlu kopā ar oreolu, tiks maskētas detaļas, kuras vajadzēja redzēt, kā arī paraugiem vai audu sekcijām ir nepieciešams diezgan plāns biezums, principā var jābūt biezākai par 10 m un citiem ierobežojumiem, divu staru traucējumu principa izmantošanu, lai izstrādātu subdiferenciālo traucējumu fāzes kontrasta metodi.
Pielāgošanas metodes:
a. DIC metode ir jāpielāgo, pamatojoties uz to, ka Kulemin sistēma jau ir pielāgota
b. Izmantojot 10 × objektīvu, nosakiet objektīva fokusēšanas pozīciju, kas var skaidri redzēt paraugu ar spilgtu redzes lauku.
c. Novietojiet polarizatoru apgaismojuma ceļā, ievērojot, ka tam jābūt orientētam austrumu-rietumu virzienā.
d. Pagrieziet kondensatora ripu pozīcijā, kas atbilst 10 × objektīva izmantošanai, ti, DIC 0.3-0.4.
e. Ievietojiet 10× objektīva DIC slīdni objektīva objektīva aizmugurē vai uz objektīva pārveidotāja.
f. Ievietojiet analizatoru attēlveidošanas optiskajā ceļā un ņemiet vērā, ka tā orientācijai jābūt dienvidiem uz ziemeļiem.
g. Nomainiet novērojamo caurspīdīgo paraugu, ieslēdziet gaismas avotu, lai paraugs būtu skaidri fokusēts.
h. Noregulējiet DIC ieliktni tā, lai diferenciālo traucējumu kontrasta attēls sasniegtu vislabāko efektu, tas ir, visredzamāko reljefa efektu.
i. Vienlaikus noregulējiet kondensatora spoguļa diafragmu, lai arī kontrasta efekts būtu optimāls.
j. Pēc tam precīzi noregulējiet parauga detaļas, lai redzētu parauga struktūru dažādos līmeņos.
k. Ja tiek ievietota papildkrāsa (pirmās kārtas sarkanā palēninājuma plāksne) un vienlaikus tiek noregulēts DIC ieliktnis, redzamības laukā var redzēt nepārtraukti mainīgās spožās krāsas ar sarkanu, oranžu, dzeltenu, zaļu, zilu, violeta, rozā, rozā violeta un zeltaini dzeltena. Pielietojuma joma: caurspīdīgas vai nekrāsojamas audu sekcijas, biezums līdz aptuveni 100?m, dzīvi audi un dzīvās šūnas kultūrā, mazi dzīvi organismi un tā tālāk.






