Fluorescences mikroskopijas principi un struktūras īpatnības
Fluorescences mikroskopija ir punkta augstas luminiscences efektivitātes izmantošana, izmantojot krāsu sistēmas filtrēšanu, lai izstarotu noteiktu gaismas viļņa garumu (piemēram, ultravioleto starojumu 3650 viļņā vai violeti zilo 4200) kā ierosmes gaismu, ierosmi. fluorescējošs materiāls paraugā izstaro dažādas fluorescences krāsas un pēc tam tiek palielināts caur objektīvu un okulāriem novērošanai. Tādā veidā spēcīga kontrasta fonā, pat ja fluorescence ir ļoti vāja, to ir viegli identificēt, augsta jutība, galvenokārt izmanto šūnu struktūras un funkcijas un ķīmiskā sastāva izpētei. Fluorescences mikroskopa pamatstruktūru veido parasts optiskais mikroskops un daži piederumi (piemēram, fluorescences gaismas avots, ierosmes filtri, divkrāsu staru atdalītājs un bloķējošie filtri utt.). Fluorescējošās gaismas avots - parasti tiek izmantota īpaši augsta spiediena dzīvsudraba spuldze (50-200W), kas var izstarot dažādus gaismas viļņu garumus, taču katram fluorescējošajam materiālam ir spēcīgākais fluorescences ierosmes viļņa garums, tāpēc ir jāpievieno ierosmes filtri (parasti ultravioletais, violetais, zilais un zaļais ierosmes filtrs), lai, apstarojot paraugus, tiktu absorbēts tikai noteikts ierosmes gaismas viļņa garums, bet pārējā gaisma tiek absorbēta. Tāpēc ir nepieciešams pievienot ierosmes filtru (parasti ultravioleto, violeto, zilo un zaļo ierosmes filtru), lai tikai noteikts ierosmes gaismas viļņa garums caur paraugu, bet cita gaisma tiktu absorbēta. Kad katra viela tiek apstarota ar ierosmes gaismu, tā ļoti īsā laikā izstaro redzamu fluorescenci ar garāku viļņa garumu nekā apstarotā gaisma. Fluorescencei ir specifiskums, kas parasti ir vājāka nekā ierosmes gaisma, lai varētu novērot specifisko fluorescenci, lietošanai ir jāizvēlas objektīva lēca, kas ir saistīta ar nepieciešamību pievienot bloķēšanu (vai slāpēšanu).
Fluorescences mikroskopa un parastā mikroskopa atšķirība
1. Apgaismojuma metode parasti ir krītoša, tas ir, gaismas avots tiek projicēts uz parauga caur objektīvu;
2. Gaismas avots ir ultravioletā gaisma, ar īsāku viļņa garumu un lielāku izšķirtspēju nekā parastiem mikroskopiem;
3. Ir divi speciāli filtri, viens gaismas avota priekšā tiek izmantots, lai filtrētu redzamo gaismu, un tas, kas atrodas starp okulāru un objektīvu, tiek izmantots ultravioletās gaismas filtrēšanai, lai aizsargātu cilvēka aci.
Fluorescences mikroskops ir arī sava veida optiskais mikroskops, galvenā atšķirība ir tā, ka abu ierosmes viļņu garums ir atšķirīgs. Tas nosaka fluorescences mikroskopa un parastā optiskā mikroskopa struktūru un dažādu metožu pielietojumu.
Fluorescences mikroskops ir imūnfluorescences citoķīmijas pamatrīks. Tas sastāv no gaismas avota, filtru plākšņu sistēmas un optiskās sistēmas un citiem galvenajiem komponentiem. Tas izmanto noteiktu gaismas viļņa garumu, lai stimulētu paraugu izstarot fluorescenci, kas tiek palielināta caur objektīva lēcu un okulāra sistēmu, lai novērotu parauga fluorescences attēlu.
