Kā nolasīt fluorescējošās mikroskopijas rezultātus, izmantojot tuneli apoptozes noteikšanai
1. Pievērsiet uzmanību trim punktiem rezultātu novērošanā, epiprojekcijas metodei, izšķirtspējas projekcijai un filtra apstrādei. Konkrēti:
Apgaismošanas metode parasti ir episkopiska, tas ir, gaismas avots tiek projicēts uz parauga caur objektīvu;
Gaismas avots ir ultravioletā gaisma, viļņa garums ir īsāks un izšķirtspēja ir augstāka nekā parastajiem mikroskopiem;
Ir divi īpaši filtri, viens gaismas avota priekšā tiek izmantots, lai filtrētu redzamo gaismu, un tas, kas atrodas starp okulāru un objektīvu, tiek izmantots ultravioleto staru filtrēšanai, lai aizsargātu cilvēka acis.
Otrkārt, fluorescējošais mikroskops, ko izmanto apoptozes mērīšanai ar tuneli, ir arī sava veida optiskais mikroskops, galvenā atšķirība ir tā, ka abu ierosmes viļņu garumi ir atšķirīgi. Tas nosaka atšķirību starp fluorescences mikroskopu un parasto optisko mikroskopu struktūras un lietojuma ziņā. Fluorescences mikroskopija ir būtisks instruments imūnfluorescējošā citoķīmijā. Tas sastāv no galvenajām sastāvdaļām, piemēram, gaismas avota, filtru plākšņu sistēmas un optiskās sistēmas. Tas ir izmantot noteiktu gaismas viļņa garumu, lai ierosinātu paraugu, lai tas izstaro fluorescenci, un novērot parauga fluorescences attēlu, pastiprinot objektīva lēcu un okulāra sistēmu.
3. Fluorescences slāpētā filtra plāksne apoptozes mērīšanai tunelī Slāpētās filtra plāksnes funkcija ir pilnībā bloķēt ierosmes gaismas pāreju un nodrošināt fluorescenci attiecīgajā viļņu garuma diapazonā. Atbilstoši ierosmes filtra plāksnei parasti izmanto šādus trīs veidu presētās filtra plāksnes:
Ultravioletās gaismas presēšanas filtra plāksne: tā var iziet cauri redzamajai gaismai un bloķēt ultravioletās gaismas iekļūšanu cauri. Var kombinēt ar UG-1 vai UG-5. Bieži lietots GG-3K430 vai GG-6K460.
Violeti zila gaismas slāpēšanas filtra plāksne: var izturēt gaismu ar viļņa garumu virs 510 nm (no zaļas līdz sarkanai), un to var kombinēt ar BG-12. Parasti tiek izmantots OG-4K510 vai OG-1K530.
Ultravioletās gaismas presēšanas filtra plāksne: var izlaist gaismu ar viļņa garumu virs 460 nm (no zila līdz sarkanai), var kombinēt ar BG-3, parasti izmanto OG-11K470AK 490, K510.
