Audu bloka tilpuma mērīšana, izmantojot bioloģiskos mikroskopus
Līdz šim audu un šūnu rentgenstaru mikroskopijas metodes ir bijušas kriofiksācijas, sasaldētas īpaši-plānas griezuma un{1}}saldēšanas žāvēšanas metodes. Lūdzu, sniedziet šādu informāciju par šo metodi:
Bioloģiskais mikroskops ar prožektoru var pārvietot prožektoru uz augšu un uz leju, lai sasniegtu mērenu spilgtumu, un maināmās diafragmas atvērumu var arī mainīt, lai sasniegtu mērenu spilgtumu. Ja gaisma ir no saules, prožektoru var atbilstoši pacelt un mainīgās gaismas diafragmu var atbilstoši palielināt. Ja gaisma ir pārāk spēcīga, prožektoru var attiecīgi pazemināt un krustojuma apertūru attiecīgi samazināt. Ja šajā situācijā joprojām jūtaties žilbinoši, varat izvēlēties novietot atbilstošu filtru uz kronšteina zem prožektora gaismas. Šis ozols var sasniegt tādu spilgtumu, kas jūs apmierina. Protams, regulējot prožektora augšējo un apakšējo pozīciju, var mainīt gaismas rādījuma diafragmas lielumu un izvēlēties piemērotus filtrus, kas prasa noteiktu prakses un pieredzes periodu.
Ļoti svarīgs jautājums bioloģiskajā mikroskopijā ir paraugu ņemšanas un šūnu izolēšanas process. Pēc liofilizēšanas un sveķu iegulšanas (FD) sasaldētās īpaši plānās sekcijas ir rūpīgi jāapstrādā, lai nodrošinātu, ka novērošanas un analīzes laikā netiek bojāts katras daļas 65 elementu saturs. Tā kā rentgenstaru mikroanalīzē ir daudz darbību un augstās izmaksas, ir žēl izdarīt nepareizus secinājumus, ja analizētās šūnas ir bojātas vai mirušas pēc ilgstošas un daudzpakāpju apstrādes. Miokarda šūnām, kas atdalītas ar želatīna apstrādi, ir divas formas: viena ir gara stieņa -forma, bet otra ir apaļa. Pēdējais attiecas uz mirstošām šūnām, kuras tiek bojātas šūnu atdalīšanas procesā.
Elektrolītu saturs un sadalījums šajos divu veidu šūnās bioloģiskajā mikroskopā ir ļoti atšķirīgs. Na ir ļoti augsts un K ir ārkārtīgi zems apļveida kardiomiocītos, un Ca koncentrācija lineārajos dendritos ir ļoti augsta. Pēc pārbaudes ar citām analītiskām metodēm ir pierādīts, ka augstais Na un zemais K apļveida šūnās un augstais Ca līmenis mitohondrijās ir membrānas bojājumu rezultāts šūnu atdalīšanas laikā. Šūnu un audu aukstās fiksācijas metode bieži vien ietver to vispirms dzēšanu un pēc tam uzglabāšanu šķidrā slāpeklī. Rūdošā fiksācija ir ļoti svarīga saglabāšanas efektam. Dzīvās šūnas vai svaigi audi ir bagāti ar ūdeni, un, dzesējot, tās šūnu vai audu daļas, kas nonāk tiešā saskarē ar aukstumaģentu (īpaši, ja dzesēšanai tiek izmantots šķidrais slāpeklis), bieži vien vispirms tiek sasaldētas un fiksētas, veidojot "čaulu", kas neļauj saspiest un nostiprināt šūnu centrālo daļu. Tāpēc, veicot rentgenstaru mikroanalīzi, bieži tiek konstatēts, ka ledus kristāli pastāv lielāko šūnu centrālajā daļā. Lai šāda situācija nenotiktu, kā aukstumaģents tiek izmantota viela, kuras kušanas temperatūra ir augstāka par šķidro slāpekli, bet zemāka par 806c. Šo vielu ir daudz, taču tās ir viegli iegūt, un vispieejamākais ir koncentrētais propāns (viršanas temperatūra 42,120 c, kušanas temperatūra 187,10 c, molekulmasa 44,1), kam ir arī ātrs dzesēšanas ātrums. Bet tā trūkums ir tas, ka tas ir viegli uzliesmojošs.
