PH mērītājs - Vides pH noteikšana un regulēšana
Visus mikroorganismus ietekmē tās vides pH, kurā tie dzīvo. Bieži vien selektīvo sugu klātbūtne sašaurina pH diapazonu, kurā tās aug. Dažreiz barotnes skābums vai sārmainība var darboties arī kā augšanas atlases faktors. Tomēr bioķīmisko testu barotnēm pH diapazons, kurā mikroorganismi uzrāda tk aktivitāti substrātā, ir šaurāks nekā augšanai nepieciešamais pH diapazons: tāpēc ir svarīgi barotnes pH pielāgot paredzētajam diapazonam. Laboratorijā sagatavojot barotni atbilstoši barotnes sastāvam, ir jāpārbauda un jāpielāgo pH. Jāuzsver, ka pat gatavai sintētiskajai dehidrētajai barotnei, ko nodrošina ražotājs (īpaši dažām dehidrētajām dehidrētajām dehidrētajām dehidrētām dehidrētām dehidrētām pamatbarotnēm), gala pH ir jāmēra pēc eksperimentālās barotnes izgatavošanas.
Visprecīzākais veids, kā izmērīt barotnes pH, ir ar pH metru. Pirms lietošanas tas jākalibrē ar standarta buferšķīdumu ar zināmu pH līmeni (parasti pH ir no 4 līdz 7). Noskalo pH metra elektrodu ar destilētu ūdeni un iegremdē to vārglāzē esošajā barotnē un pēc tam no pH metra skalas nolasa barotnes pH. Katrs ražotājs sniedz detalizētas lietošanas instrukcijas katram pH metra veidam.
Gatavojot barotni, PH var viegli noregulēt, izmantojot pH metru ar mehānisku maisīšanu. Barotne jāsagatavo traukā (piemēram, lielā vārglāzē), ko var nepārtraukti maisīt. vai ar teflonu iesaiņoti magnēti. Agaru saturošās barotnes pH ir jāpielāgo pēc atkausēšanas, ko viegli izdarīt ar apsildāmu magnētisko maisītāju. Regulējot pH, izmantojiet standarta buferšķīdumu ar zināmu pH, lai vispirms kalibrētu pH metru. Pēc tam barotnē ievietojiet kompozītmateriālu elektrodu un pretestības termometru (ja tāds ir), lēnām pievienojiet atbilstošu daudzumu sālsskābes un nātrija hidroksīda no vārglāzes gala prom no elektroda, lai vide varētu sasniegt un uzturēt nepieciešamo pH.
PH metra temperatūras kompensācijā jāņem vērā temperatūras ietekme uz elektrodu sistēmu: dažos atšķaidījumos un barotnēs pH ievērojami mainās līdz ar temperatūru. Šķidrām barotnēm un atšķaidījumiem pH parasti var regulēt un izmērīt vai nu pie 25 grādiem, vai arī temperatūrā, kurā tie tiek izmantoti.
Agara barotnes pH ir jānoregulē pēc izšķīdināšanas, un šķīdināšanas temperatūra ir virs 45 grādiem, tāpēc cietās barotnes pH jānosaka tās lietošanas temperatūrā. Šajā laikā ir jāizmanto plakanas galvas kompozītmateriāla elektrods, un pH metra temperatūras kompensācija ir manuāli jākalibrē. Ja, gatavojot barotni, tiek konstatēts, ka barotnes pH atšķiras starp kušanas stāvokli un cietēšanas stāvokli, tas nozīmē, ka pH regulēšanā ir kļūda.
Tāpat, ja sagatavotā barotne tiek termiski sterilizēta (piemēram, autoklāvā), tajā var mainīties arī pH. Attiecībā uz dehidrētu barotni ražotājs to ir ņēmis vērā, un parasti pH nav jāpielāgo, taču rūpīgi jāpārbauda izmantojamās barotnes pH. Ja dehidrētā agara barotnes pH ir jāpielāgo atkārtotas šķīdināšanas vai sagatavošanas laikā, vislabāk to pēc sterilizācijas noregulēt ar filtrēti sterilizētu sālsskābi un nātrija hidroksīda šķīdumu, lai izvairītos no barotnes pārkaršanas. Sagatavojot barotnes ar dažādām izejvielām vai farmaceitiskajiem līdzekļiem, pēc autoklāvēšanas jāpārbauda barotnes pH. Turklāt, ja tiek konstatēts, ka barotnes pH mainās vienādi pēc katra autoklāva, sagatavojot barotni, pH var atbilstoši noregulēt. Tomēr pēc sterilizācijas joprojām ir jānosaka barotnes galīgais pH.
