Fluorescences mikroskopijas iepriekšēja pārbaude un regulēšana:
(1) Pirms katra fluorescences novērojuma regulāri jāpārbauda kvēldiega izlīdzināšana, optiskā ceļa fokusēšana, apertūras apertūras apertūra un fluorescences ierīces redzamības lauka apertūras iestatījumi.
(2) Vai pārveidotājā ir uzstādīti nepieciešamie fluorescences ierosmes/emisijas filtra komponenti, vai fluorescences mikroskopa objektīvs ir pareizi konfigurēts un vai ir noņemti eļļas traipi un putekļi objektīva lēcas priekšā.
(3) Līdzīgi, novērojot caurlaidīgās gaismas atšķirību, ir jāpārbauda fokusēšanas lēcas konjugācija ar centru un kontrasta gredzens ar objektīva lēcu.
(4) Pārbaudiet, vai uz parauga turētāja (stikla priekšmetstikliņa, vāka stikla un citiem traukiem) nav karājies šķidrums vai putekļi un vai biezums ir objektīva lēcas kalibrētajā darba attāluma diapazonā. Šķēlēs sagrieztie paraugi nedrīkst būt pārāk biezi, ieteicams apmēram mazāks par 10 μm vai vienāds ar to.
(5) Tā kā apgaismojuma avotā ir ultravioletie stari, virs iekraušanas platformas jānovieto brūns saulessargs, lai novērstu tīklenes UV bojājumus.
(6) Nestabils spriegums var samazināt augstsprieguma dzīvsudraba spuldžu kalpošanas laiku, un gaismas avota barošanas avotam jāpievieno sprieguma regulators.
(7) Lai pagarinātu dzīvsudraba lampas kalpošanas laiku, to var izslēgt tikai 15 minūtes pēc ieslēgšanas; Kad dzīvsudraba spuldzes dienasgaismas barošanas avots ir izslēgts, tai ir jāgaida vismaz 10 minūtes, lai dzīvsudraba tvaiki pēc atkārtotas palaišanas atdzist sākotnējā stāvoklī, pretējā gadījumā tas ietekmēs lampas kalpošanas laiku.
Fluorescences mikroskopa attēlu novērošana:
(1) Pēc luminiscences spuldzes avota ieslēgšanas apmēram 5-10 minūtes ierosmes intensitātei ir tendence stabilizēties, un paraugs tiek ielādēts novērošanai; Lai novērstu pārmērīgu gaismas ierosmi fokusēšanas un attēlu meklēšanas laikā, kas izraisa parauga fluorescences slāpēšanu, vispirms tiek samazināta fluorescences mikroskopa apertūra vai pievienots ND filtrs, lai regulētu ierosmi līdz mērenai intensitātei, un parauga stadija tiek pārvietota. regulāri. Pēc spoguļattēla noteikšanas tas tiek noregulēts uz fluorescences stāvokli ierakstīšanai.
(2) Pielāgojumi ar sliktu attēla kvalitāti. Nepieciešamie pielāgošanas pasākumi, ko var veikt, izņemot paraugu sagatavošanas faktorus, ir:
① Izslēdziet attēlveidošanas optiskajā ceļā ēnojošās vai ierobežojošās ierīces, piemēram, DIC piederumus, ND filtrus utt.
② Pielāgojiet fluorescences mikroskopa kolektora fokusēšanas un apertūras apertūras diafragmas atvērumu.
③ Uzmanīgi noregulējiet fluorescences mikroskopa objektīva pārklājuma korekcijas gredzenu.
