Fluorescences mikroskopa darbības princips un strukturālās īpašības
Fluorescences mikroskops izmanto punktu ar augstu gaismas efektivitāti, lai izstarotu gaismu ar noteiktu viļņa garumu (piemēram, ultravioleto gaismu 3650 vai violeti zilo gaismu 4200) caur krāsu filtru sistēmu kā ierosmes gaismu, un pēc tam ierosina paraugā esošās fluorescējošās vielas, lai izstarotu. fluorescenci ar dažādām krāsām un pēc tam novēro tās, pastiprinot objektīvu un okulāru. Tādā veidā zem spēcīga kontrasta fona, pat ja fluorescence ir ļoti vāja, to ir viegli identificēt un tam ir augsta jutība. To galvenokārt izmanto šūnu struktūras un funkcijas un ķīmiskā sastāva izpētei. Fluorescences mikroskopa pamatstruktūra sastāv no parastā optiskā mikroskopa un dažiem piederumiem (piemēram, fluorescējošas gaismas avota, ierosmes filtra, dihromiskā stara sadalītāja un bloķējošā filtra utt.). Fluorescējošās gaismas avots —— Parasti izmanto īpaši augsta spiediena dzīvsudraba lampu (50-200W), kas var izstarot gaismu ar dažādu viļņu garumu, taču katrai fluorescējošai vielai ir ierosmes gaismas viļņa garums, kas rada visspēcīgāko fluorescenci, tāpēc jāpievieno ierosmes filtri (parasti ultravioletie, purpursarkanie, zilie un zaļie ierosmes filtri), lai uz paraugu tiktu pārraidīts tikai noteikts ierosmes gaismas viļņa garums, bet visa pārējā gaisma tiktu absorbēta. Pēc tam, kad katra viela ir apstarota ar ierosmes gaismu, tā ļoti īsā laikā izstaro redzamu fluorescenci ilgāk par apstarošanas viļņa garumu. Fluorescencei ir specifiskums, kas parasti ir vājāks nekā ierosmes gaisma. Lai novērotu specifisko fluorescenci, aiz objektīva ir nepieciešams bloķēt (vai nomākt) un izmantot kopā.
Atšķirība starp fluorescences mikroskopu un parasto mikroskopu
1. Apgaismojuma režīms parasti ir epizodisks, tas ir, gaismas avots tiek projicēts uz parauga caur objektīva lēcu;
2. Gaismas avots ir ultravioletā gaisma ar īsu viļņa garumu un augstāku izšķirtspēju nekā parastajam mikroskopam;
3. Ir divi speciāli filtri, viens gaismas avota priekšā tiek izmantots, lai filtrētu redzamo gaismu, un tas, kas atrodas starp okulāru un objektīvu, tiek izmantots ultravioletās gaismas filtrēšanai, lai aizsargātu cilvēku acis.
Fluorescences mikroskops ir arī sava veida optiskais mikroskops, galvenā atšķirība ir tā, ka to ierosmes viļņu garumi ir atšķirīgi. Tas nosaka atšķirību starp fluorescences mikroskopu un parasto optisko mikroskopu struktūrā un lietojumā.
Fluorescences mikroskops ir imūnfluorescences citoķīmijas pamatrīks. Tas sastāv no gaismas avota, filtra plākšņu sistēmas un optiskās sistēmas. Tas izmanto gaismu ar noteiktu viļņa garumu, lai ierosinātu paraugu un izstaro fluorescenci, un palielina to caur objektīvu un okulāra sistēmu, lai novērotu parauga fluorescences attēlu.
