Daudzfotonu lāzera skenēšanas mikroskopijas plusi un mīnusi
Daudzfotonu lāzerskenējošā mikroskopija ir eksperimentāla metode, kuras pamatā ir lāzerskenējošā mikroskopa tehnoloģija, kas nodrošina vairāk **optiskās sekcijas iespēju 3D novērošanā. Daudzfotonu fluorescences ierosmes metode izmanto garus sarkanās vai gandrīz infrasarkanās gaismas viļņu garumus, lai iegūtu augstas izšķirtspējas fluorescējošus paraugu attēlus ar minimālu aktīvo paraugu nogalināšanu, padarot to piemērotu dzīvu šūnu, īpaši biezu dzīvo audu, piemēram, smadzeņu šķēlumu, embriju, attēlveidošanai. veseli orgāni un pat veseli organismi.
Priekšrocības ir šādas:
1, sarkanās gaismas vai infrasarkanās gaismas ierosmes izmantošana, gaismas izkliede ir maza(izkliedēšanamazsdaļiņas un apgrieztās attiecības ceturtās pakāpes viļņa garums).
2, nav nepieciešams caurums, var savākt vairāk izkliedētu fotonu no attēlveidošanas šķērsgriezuma.
3, caurums nevar atšķirt izkliedētos fotonus, ko izstaro ārpus fokusa apgabals vai fokusa apgabals, vairāku fotonu dziļajā attēlveidošanas signāla un trokšņa attiecība ir laba.
4, ultravioletās vai redzamās gaismas viena fotona ierosme, ko izmanto starā, lai sasniegtu fokusa plakni, pirms paraugs viegli uzsūcas un novājinās, nav viegli dziļi ierosināts.
5, bioloģiskā mikroskopa novērojumā, * pirmais apsvērums ir nebojāt paša organisma aktīvo stāvokli, uzturēt ūdens, jonu koncentrāciju, skābekļa un barības vielu cirkulāciju. Gaismas novērošanas gadījumos gan siltuma, gan fotonu enerģijai jāpaliek šūnā, nekaitējot apstarošanas, gaismas enerģijas daudzumam.
6, vairāku fotonu mikroskopam ir arī daudz priekšrocību. Piemēram, trīsdimensiju izšķirtspēja, dziļuma ielaušanās, izkliedes efektivitāte, fona gaisma, signāla-trokšņa attiecība, kontrole utt., Ir iepriekšējie lāzera mikroskopi, kuriem nav vai ir nesalīdzināmi pēc īpašībām.
Daudzfotonu konfokālais lāzera skenēšanas mikroskops ir paplašināts dažādās pētniecības un pielietošanas jomās. Tas spēj veikt trīsdimensiju nesagraujošu paraugu novērošanu to dabiskajā stāvoklī un var uzlabot sistēmas izšķirtspēju un signāla-trokšņa attiecību. Izmantojot materiāla īpašību maiņu pēc vairāku fotonu ierosmes, iespējams panākt arī trīsdimensiju augstuma datu uzglabāšanu un trīsdimensiju mikrofabriku jebkurā virzienā, kam ir augsta pielietojuma vērtība. Var uzskatīt, ka, attīstoties tehnikai, materiāliem, lāzertehnoloģijām un citām tehnoloģijām, kas saistītas ar daudzfotonu konfokālo mikroskopiju, daudzfotonu konfokālais lāzerskenējošs mikroskops būs lielāka attīstība un plašāks pielietojums.
Trūkumi ir šādi:
1, tikai fluorescences attēlveidošana.
2, ja paraugā ir hromofori, kas var absorbēt ierosmes gaismu, piemēram,pigmenti, paraugsvar tikt termiski bojāti.
3, izšķirtspēja ir nedaudz samazināta, lai ganto var uzlabot, vienlaikus izmantojot konfokālo apertūru, betbūs signāla zudums.
4. Daudzfotonu skenējošās mikroskopijas izmaksas ir augstas, jo ir ierobežoti dārgi īpaši ātrie lāzeri.
