Vairākas problēmas fāzes kontrasta mikroskopijas izmantošanā:
(1) Fāzes maiņa, kad n '
(2) Halo un pakāpeniskas aptumšošanas efekts fāzes kontrasta mikroskopijas attēlveidošanas procesā, kad struktūra kļūst tumšāka fāzes aizkaves dēļ, nav gaismas zudums, bet gan gaismas pārdales rezultāts attēla plaknē. Tāpēc gaisma, kas skaidri pazūd tumšās vietās, parādīsies kā spilgts oreols ap tumšākiem objektiem. Tas ir fāzes kontrasta mikroskopijas trūkums, kas kavē smalku struktūru novērošanu. Ja gredzenveida apertūra ir ļoti šaura, halo parādība ir smagāka. Vēl viena fāzes kontrasta mikroskopijas parādība ir aptumšošanas efekts, kas attiecas uz kontrasta samazināšanos lielāka laukuma malās ar tādu pašu fāzes aizkavi, kas novērota fāzes kontrasta novērošanas laikā.
(3) Parauga biezuma ietekme Vērojot atšķirību, parauga biezumam jābūt 5 μm vai plānākam. Izmantojot biezākus paraugus, parauga augšējais slānis ir dzidrs, savukārt dziļākais slānis būs izplūdis un radīs fāzes nobīdes traucējumus un gaismas izkliedes traucējumus.
(4) Segstikla un priekšmetstikliņa ietekmei uz paraugu jābūt pārklātam ar vāku, pretējā gadījumā gredzenveida apertūras gaišais gredzens un fāzes plāksnes tumšais gredzens ir grūti pārklājas. Diferenciālajam novērojumam ir augstas prasības arī bīdāmā un vāka stikla stikla kvalitātei. Ja ir skrāpējumi, nevienmērīgs biezums vai nelīdzenums, tas var izraisīt spilgtā gredzena izkropļojumus un fāzes traucējumus. Turklāt, ja stikla priekšmets ir pārāk biezs vai pārāk plāns, gredzenveida atvere kļūs lielāka vai mazāka.
Šobrīd optiskie mikroskopi ir attīstījušies no tradicionālajiem bioloģiskajiem mikroskopiem līdz dažāda veida specializētiem mikroskopiem. Saskaņā ar attēlveidošanas principiem tos var iedalīt:
① Ģeometriskais optiskais mikroskops: ieskaitot bioloģisko mikroskopu, krītošās gaismas mikroskopu, apgriezto mikroskopu, metalogrāfisko mikroskopu, tumšā lauka mikroskopu utt.
② Fizikālais optiskais mikroskops: ieskaitot fāzes kontrasta mikroskopu, polarizācijas mikroskopu, traucējumu mikroskopu, fāzes kontrasta polarizācijas mikroskopu, fāzes kontrasta traucējumu mikroskopu, fāzes kontrasta fluorescences mikroskopu utt.
③ Informācijas pārveidošanas mikroskopi: ieskaitot fluorescences mikroskopus, mikrospektrometrus, attēlu analīzes mikroskopus, akustiskos mikroskopus, fotomikroskopus, televīzijas mikroskopus utt.
Uzskaitiet vairākus mikroskopu lietojumus: a Bioloģiskais mikroskops: Vispārīgi runājot, mikroskopus var iedalīt stereomikroskopos un bioloģiskajos mikroskopos. Dažādu mērķu un prasību dēļ ir radušās daudzas nozares, taču pamatprincipi paliek tie paši. Polarizācija, fāzes kontrasts, caurlaidība un krītošā gaisma joprojām tiek klasificēti kā bioloģiskie mikroskopi. Stereoskopiskais mikroskops, kas pazīstams arī kā anatomiskais mikroskops, cietais mikroskops un stereomikroskops, ir daudzpusīgs mikroskops. Tas ir viegli lietojams, tam ir zemas prasības paraugiem, tam ir liels darba attālums, un novērošanas laikā ir spēcīga trīsdimensiju sajūta. To var izmantot, lai novērotu fiziskus objektus vai veiktu dažas darbības ar paraugiem novērošanas laikā. Tā vietā, lai paraugu sagrieztu kā bioloģisko mikroskopu, ir nepieciešama atbilstoša tehnoloģija un aprīkojums. Tāpēc stereomikroskopiem ir plašs pielietojuma klāsts tādās jomās kā mikroelektronika, precīzu instrumentu montāža un apkope, kā arī mikrogravēšana. Plaši izmantots anatomijā un mikroķirurģijā bioloģijas un medicīnas jomās (šobrīd klasificēti kā ķirurģiskie mikroskopi), bioloģijā un medicīnā izmantotais gaismas avots var būt tikai aukstās gaismas avots (optiskā šķiedra); Izmanto rūpniecībā nelielu detaļu un integrālo shēmu novērošanai, montāžai, pārbaudei un citiem darbiem. Metalogrāfiskais mikroskops: daudziem cilvēkiem patīk to rakstīt kā "metallogrāfisko mikroskopu". Metalogrāfiskais mikroskops ir mikroskops, ko īpaši izmanto, lai novērotu necaurspīdīgu objektu, piemēram, metālu un minerālu, metalogrāfisko struktūru. Šos necaurspīdīgos objektus nevar novērot parastajā caurlaidības mikroskopā, tāpēc galvenā atšķirība starp tiem un parasto mikroskopu ir tāda, ka pirmais izmanto atstaroto gaismu, bet otrs izmanto caurlaidīgo gaismu. Metalogrāfiskajā mikroskopā apgaismojuma stars tiek novirzīts no objektīva lēcas uz novērotā objekta virsmu, atstarojas virsmā un pēc tam tiek atgriezts objektīva lēcā attēlveidošanai. Šī atstarojošā apgaismojuma metode tiek plaši izmantota arī integrālās shēmas silīcija plāksnīšu noteikšanā.
