Daudzfotonu lāzera skenēšanas mikroskopu stiprās puses un ierobežojumi
Priekšrocības ir šādas:
1. Sarkanās vai infrasarkanās gaismas ierosinātā gaismas izkliede ir neliela (mazo daļiņu izkliede ir apgriezti proporcionāla viļņa garuma ceturtajai pakāpei).
2. Nav nepieciešami caurumi, kas spēj savākt vairāk izkliedētu fotonu no attēlveidošanas šķērsgriezuma-.
3. Caurumi nevar atšķirt izkliedētos fotonus, kas izstaro no defokusētiem vai fokusa apgabaliem, un daudzfotoniem ir labāka signāla -pret-trokšņu attiecība dziļajā attēlveidošanā.
4. Ultravioleto vai redzamo gaismu, ko izmanto viena fotona ierosināšanai, paraugs viegli absorbē un vājina, pirms stars sasniedz fokusa plakni, tādējādi apgrūtinot dziļu slāņu ierosmi.
5. Runājot par bioloģisko mikroskopisko novērošanu, pirmais apsvērums ir nesabojāt paša organisma aktīvo stāvokli un uzturēt ūdens, jonu koncentrācijas, skābekļa un barības vielu cirkulāciju. Gaismas novērošanas jomā gan siltuma, gan fotonu enerģijai jāpaliek apstarošanas dozas robežās un gaismas enerģijai, kas nebojā šūnas.
6. Daudzfotonu mikroskopijai ir arī daudz priekšrocību. Trīsdimensiju izšķirtspējas, dziļuma invāzijas, izkliedes efektivitātes, fona gaismas, signāla-/-trokšņu attiecības, kontroles uc ziņā lāzermikroskopiem ir nepārspējamas vai labākas īpašības, kādas nebija iepriekšējiem lāzera mikroskopiem.
Daudzfotonu konfokālais lāzerskenēšanas mikroskops ir paplašināts, aptverot dažādas pētniecības un pielietojuma jomas. Tas var veikt trīsdimensiju nesagraujošu novērošanu paraugiem to dabiskajā stāvoklī un uzlabot sistēmas izšķirtspēju un signāla-pret{3}}trokšņu attiecību. Izmantojot materiāla īpašību izmaiņas pēc vairāku fotonu ierosmes}}, trīsdimensiju augstuma datu uzglabāšanas}}dim{4} var panākt arī trīsdimensiju mikroapstrādi jebkurā virzienā, kam ir augsta pielietojuma vērtība Var uzskatīt, ka, attīstoties mehāniskajām, materiālu un lāzertehnoloģijām, kas saistītas ar daudzfotonu konfokālo mikroskopiju, daudzfotonu konfokālās lāzerskenējošās mikroskopijas attīstība un pielietojums būs plašāks.
Trūkumi ir šādi:
1. Tikai fluorescences attēlveidošanai.
2. Ja paraugā ir hromofori, kas var absorbēt ierosmes gaismu, piemēram, pigmenti, paraugs var tikt pakļauts termiskiem bojājumiem.
3. Izšķirtspēja ir nedaudz samazināta, lai gan to var uzlabot, vienlaikus izmantojot konfokālos mazos caurumus, būs signāla zudums.
4. Dārgo ultraātro lāzeru ierobežojumu dēļ daudzfotonu skenēšanas mikroskopu izmaksas ir salīdzinoši augstas.
