Ir divu veidu fluorescences mikroskopi, kuru pamatā ir to gaismas ceļi.
1. Transmisijas fluorescences mikroskops: ierosmes gaismas avots iet cauri parauga materiālam caur kondensatoru, lai ierosinātu fluorescenci. Parasti tiek izmantots tumšā lauka kolektors vai var izmantot parasto kolektoru, un reflektors ir noregulēts, lai novirzītu un sāniski izstarotu ierosmes gaismu uz paraugu. Šis ir vecāks fluorescences mikroskops. Priekšrocība ir tāda, ka fluorescence ir spēcīga pie maza palielinājuma, bet trūkums ir tas, ka fluorescence vājinās, palielinoties palielinājumam. Tāpēc labāk ir novērot lielākus paraugu materiālus.
2. Epifluorescences mikroskops ir jauna veida fluorescences mikroskops, kas izstrādāts mūsdienās. Atšķirība no iepriekš minētā ir tāda, ka ierosmes gaisma krīt uz leju no objektīva lēcas uz parauga virsmu, tas ir, to pašu objektīvu izmanto kā apgaismojuma kondensatoru un objektīvu fluorescences savākšanai. Optiskajam ceļam ir jāpievieno divu krāsu staru sadalītājs, kas ir 45% ar optisko urānu. Leņķis, ierosmes gaisma tiek atspoguļota objektīva lēcā un koncentrēta uz paraugu. Parauga ģenerētā fluorescence un ierosmes gaisma, ko atstaro objektīva lēcas virsma un pārklājuma stikla virsma, vienlaikus nonāk objektīva lēcā un atgriežas dihromatiskajā staru sadalītājā, lai ierosmes gaisma Atdalīta no fluorescences, atlikušais ierosinājums. pēc tam gaismu absorbē bloķējošais filtrs. Ja izmantojat dažādus ierosmes filtru/divkrāsu staru sadalītāja/bloķējošo filtru kombinācijas ieliktņus, varat apmierināt dažādu fluorescences reakciju produktu vajadzības. Šāda veida fluorescences mikroskopa priekšrocība ir tāda, ka redzes lauks ir vienmērīgi apgaismots, attēls ir skaidrs un jo lielāks palielinājums, jo spēcīgāka ir fluorescence.
(2) Kā lietot fluorescences mikroskopu.
1. Ieslēdziet gaismas avotu, un īpaši augstspiediena dzīvsudraba spuldzei ir jāsasilst vairākas minūtes, lai sasniegtu spožāko punktu.
2. Transmisijas fluorescences mikroskopiem starp gaismas avotu un kondensatoru ir jāuzstāda nepieciešamais ierosmes filtrs un aiz objektīva lēcas ir jāuzstāda attiecīgais bloķējošais filtrs. Epifluorescences mikroskopiem gaismas ceļa spraugā jāievieto nepieciešamais ierosmes filtrs/divkrāsu staru sadalītāja/bloķējošā filtra ieliktnis.
3. Izmantojiet maza palielinājuma mikroskopu, lai novērotu un noregulētu gaismas avota centru atbilstoši dažādu fluorescences mikroskopu modeļu regulēšanas ierīcēm tā, lai tas atrastos visa apgaismojuma vietas centrā.
4. Novietojiet parauga gabalu un noregulējiet fokusu, lai novērotu. Lūdzu, pievērsiet uzmanību lietošanas laikā: Nevērojiet filtru tieši ar acīm, lai izvairītos no acu bojājumiem; novērojot paraugu ar eļļas lēcu, jāizmanto īpašas nefluorescējošas eļļas lēcas; augstspiediena dzīvsudraba lampu nevar atvērt uzreiz pēc tās izslēgšanas. To var atkal iedarbināt pēc 5 minūtēm, pretējā gadījumā tas būs nestabils un ietekmēs dzīvsudraba lampas kalpošanas laiku.
(3) Novērojiet zem fluorescences mikroskopa uz mācību platformas, izmantojot zili violetu gaismas filtru. Redzams, ka pasāža ir o. Šūnās, kas iekrāsotas ar 01% akridīna oranžu fluorescējošu krāsu, kodols un citoplazma tiek ierosināti, lai iegūtu divas dažādas fluorescences krāsas (tumši zaļa un oranži sarkana).
