Taisns biofluorescences mikroskops
Fluorescences mikroskopijas princips ir izmantot ļoti efektīvu punktu gaismas avotu (piemēram, īpaši augsta spiediena dzīvsudraba lampu), lai izdalītu noteiktu gaismas viļņa garumu (piemēram, ultravioletā gaisma 3650 λ vai purpursarkanas zilas gaismas 4200 λ), izmantojot krāsu filtru sistēmu kā ierosmes gaismu, kas fluoresces spiedes laikā aizrauj fluoresces, kas aizrauj. Pēc tam to filtrē ar bloķējošu (vai nomācošu) filtru aiz objektīva objektīva un novēro caur okulāra palielināmo efektu.
Bloķējošajam filtram ir divas funkcijas: pirmkārt, tas absorbē un bloķē ierosmes gaismu iekļūšanu okulārā, lai izvairītos no iejaukšanās fluorescencē un sabojāt acis; Otrais ir atlasīt un ļaut iet cauri noteiktai fluorescencei, parādot īpašu dienasgaismas krāsu.
Fluorescences mikroskopus var iedalīt divos veidos, pamatojoties uz gaismas ceļa principu:
1. Transmisijas fluorescences mikroskops
Vecāki fluorescences mikroskopi izmanto uzmanības centrā, lai uzbudinātu fluorescenci, izlaižot ierosmes gaismas avotu caur parauga materiālu. Tās priekšrocība ir spēcīga fluorescence ar nelielu palielinājumu, taču tā trūkums ir tāds, ka tā fluorescence samazinās, palielinoties palielinoties. Tātad tas ir piemērots tikai lielāku paraugu materiālu novērošanai.
2. Krītošā gaismas fluorescences mikroskops
Uzbudinājuma gaisma no objektīva objektīva nokrīt uz parauga virsmas, izmantojot to pašu objektīvu kā apgaismojuma kondensatoru un objektīvu fluorescences savākšanai.
Optiskajam ceļam jāpievieno divu krāsu staru sadalītājs (dihroiskais spogulis), kas veido 45 grādu leņķi ar optisko asi. Ierosmes gaisma tiek atspoguļota objektīvā objektīvā un koncentrējas uz paraugu. Parauga ģenerētā fluorescence, kā arī ierosmes gaisma, kas atspoguļota no objektīva virsmas un pārklāj stiklu, vienlaikus ievadiet objektīvu objektīvā un atgriežas pie divu krāsu staru sadalītāja, lai atdalītu ierosmes gaismu un fluorescenci. Pēc tam atlikušo ierosmes gaismu bloķē filtra absorbcija. Ja tiek izmantotas dažādas ierosmes filtru kombinācijas, divu krāsu staru atdalītājus un bloķēšanas filtri, tie var apmierināt dažādu dienasgaismas reakcijas produktu vajadzības.
Šī fluorescences mikroskopa priekšrocības ir vienāds lauka apgaismojums, dzidrs attēlveidošana un spēcīgāka fluorescence ar lielāku palielinājumu.
