Kādas ir fluorescējošā mikroskopa īpašās strukturālās sastāvdaļas?
Krāsu filtra bloks ir svarīga fluorescences mikroskopa daļa, un tā galvenās sastāvdaļas sastāv no pirmā barjerfiltra ierosmes gaismai, otrā barjerfiltra emisijas gaismai un staru sadalīšanas spoguļa. Krāsu filtru modeļi un dažādu ražotāju nosaukumi bieži ir pretrunīgi.
1. Uzbudinājuma gaismas filtrs un emisijas gaismas filtrs: pamatojoties uz gaismas avota un fluorescējošā pigmenta īpašībām, parasti tiek izvēlēti šādi trīs saskaņošanas veidi, lai nodrošinātu ierosmes gaismu noteiktā viļņu garuma diapazonā un ļautu parauga ierosinātajai fluorescencei iziet cauri un sasniegt okulāru attēlveidošanai.
UV ierosme: ierosmes gaismas filtrs var ļaut UV gaismai iziet cauri un bloķēt redzamo gaismu virs 400 nm. Atbilstošais emisijas gaismas filtrs ļauj iziet cauri zilajai gaismai, un gaisma redzes laukā šķiet zila, piemēram, ja tiek izmantota DAPI krāsošanai.
Zilās gaismas ierosme: ierosmes gaismas filtrs var ļaut zilajai gaismai iziet cauri un bloķēt gaismu no citiem viļņu garumiem. Atbilstošais emisijas gaismas filtrs ļauj iziet cauri zaļai gaismai, piemēram, GFP krāsošanas marķieriem.
Zaļās gaismas ierosme: ierosmes gaismas filtrs ļauj iziet cauri zaļajai gaismai un bloķē gaismu no citiem viļņu garumiem. Atbilstošais emisijas gaismas filtrs parasti ļauj iziet cauri sarkanai gaismai, piemēram, rodamīna krāsošanai.
2. Daļēji caurspīdīgs un daļēji atstarojošs krāsu filtrs: tā funkcija ir pilnībā bloķēt ierosmes gaismas iekļūšanu cauri un atspoguļot to; Un izstaro gaismu attiecīgajā viļņu garuma diapazonā. Tās modelis atbilst ierosmes gaismas filtram un emisijas gaismas filtram.
(2) Objektīva lēca un okulārs
Var izmantot dažādus objektīvus, taču vislabāk ir izvēlēties objektīvus ar papildu skalu un hromatiskās aberācijas samazināšanu, jo to pašfluorescence ir ārkārtīgi zema un to gaismas caurlaidība (viļņu garuma diapazons) ir piemērota fluorescencei. Tā kā attēla fluorescences spilgtums mikroskopa laukā ir tieši proporcionāls objektīva apertūras koeficienta kvadrātam un apgriezti proporcionāls tā palielinājumam, lai uzlabotu fluorescences attēlu spilgtumu, jāizmanto objektīvs ar lielāku diafragmas attiecību. Īpaši paraugiem ar nepietiekamu fluorescenci ir jāizmanto objektīvs ar lielu diafragmas atvēruma attiecību un augstu gaismas caurlaidību, kam pievienots okulārs ar mazāko iespējamo palielinājumu.
(3) Citas optiskās ierīces
Spoguļa atstarojošais slānis parasti ir pārklāts ar alumīniju, jo alumīnijs mazāk absorbē ultravioleto un redzamo gaismu zili purpursarkanajā zonā, atstarojot vairāk nekā 90% (kamēr sudraba atstarošanās spēja ir tikai 70%). Parasti tiek izmantoti plakanie spoguļi. Fokusēšanas lēca, kas īpaši izstrādāta un ražota fluorescences mikroskopiem, ir izgatavota no kvarca stikla vai cita stikla, kas laiž cauri ultravioleto gaismu. Krītošās gaismas ierīce papildus tam, ka tai ir caurlaidīga gaismas avota funkcija, ir vairāk piemērota tiešai necaurspīdīgu un daļēji caurspīdīgu paraugu, piemēram, biezu plākšņu, filtru membrānu, baktēriju koloniju, audu kultūru un citu paraugu novērošanai. Pēdējos gados ir izstrādāti daudzi jauni fluorescences mikroskopu veidi, izmantojot krītošās gaismas ierīci, kas pazīstama kā krītošās gaismas fluorescences mikroskops.
(4) Gaismas avots
Mūsdienās kā gaismas avoti parasti tiek izmantotas augstspiediena{0}}dzīvsudraba spuldzes ar jaudu 50 vai 100 W. Darbības laikā izlāde notiek starp diviem elektrodiem, izraisot dzīvsudraba iztvaikošanu un spiediena palielināšanos sfēras iekšpusē (parasti šis process aizņem apmēram 5-15 minūtes). Šī procesa laikā tiek izstaroti gaismas kvanti, un izdalītās gaismas viļņa garums ir pietiekams dažādu fluorescējošu vielu ierosināšanai. Tāpēc to plaši izmanto fluorescences mikroskopos.
Dzīvsudraba spuldžu kalpošanas laiks ir salīdzinoši īss, parasti 200 stundas. Reaģējot uz šo ekspluatācijas laika ierobežojumu, pēdējos gados ir plaši izmantots jauna veida dienasgaismas gaismas avots X-Cite ar īpaši ilgu spuldzes kalpošanas laiku 2000 stundu un elastīgu lietošanu - bez iepriekšējas uzsildīšanas, gatavs lietošanai.
