Lāzera konfokālā mikroskopa darbības princips
Lāzera konfokālā mikroskopa darbības princips
Olympus lāzera konfokālais mikroskops ir detektors, kas spēj uztvert signālus. Tās darbības princips ir tāds, ka punktveida gaismas avots tiks attēlots kā palielināts plankums, ko sauc par "gaisīgu disku", pēc tam, kad tas ir izlaists caur fluorescences mikroskopu. Standarta baltās gaismas interferometriskajā konfokālajā mikroskopā ārpus fokusa plaknes izstarotā gaisma tiek bloķēta ar caurumu, kura izmērs nosaka, cik daudz Airy diska var iekļūt detektorā. Jo mazāks ir caurums, jo asāks ir iegūtais attēls, un attēls ir blāvāks, jo tiek zaudēta lielākā daļa gaismas. Jo mazāks ir apertūras caurums, jo labāka ir izšķirtspēja, taču atkal tiek zaudēts vairāk gaismas signāla. Olympus lāzera konfokālais mikroskops vienlaikus var nodrošināt krāsu CCD attēlu un lāzerskenēšanas konfokālo attēlu. Olympus konfokālie lāzera mikroskopi spēj izmērīt augstumu, izmantojot viena gaismas avota, viena parauga un viena detektora konfokālo iestatījumu. Kad paraugs atrodas objektīva lēcas fokusa plaknē un no parauga virsmas atstarotā lāzera gaisma tiek fokusēta konfokālajā apertūrā, fotodetektors saņems signālu no parauga. Kad paraugs atrodas ārpus fokusa, konfokālā apertūra nesaņem lāzera signālu, tāpēc tiek savākts tikai fokusa signāls. Šī funkcija var realizēt Olympus lāzera konfokālā mikroskopa optiskās sadalīšanas funkciju.
Konfokālās lāzermikroskopijas priekšrocības
1. Izmantojot lāzera gaismu kā gaismas avotu, pēc tam, kad ir marķētas atbilstošās dienasgaismas zondes, paraugs tiek skenēts pa punktam, lai iegūtu divdimensiju optisko šķērsgriezuma attēlu slāni pa slānim. Tam ir "šūnu CT" funkcija, un to var atbalstīt datora trīsdimensiju rekonstrukcijas programmatūra, lai iegūtu trīsdimensiju attēlus, kurus var pagriezt jebkurā leņķī, lai novērotu šūnu un audu trīsdimensiju formu un telpiskās attiecības;
2. Var novērot dzīvas šūnas un audus bez bojājumiem un dinamiski izmērīt dzīvo šūnu fizioloģisko informāciju, piemēram, Ca jonu koncentrāciju un pH vērtību šūnās;
3. Tas var izmērīt šūnu membrānas plūstamību, starpšūnu komunikāciju, šūnu saplūšanu, citoskeleta elastību utt., un to var izmantot kā "vieglu nazi", lai pabeigtu intracelulāro "ķirurģiju". Šī tehnoloģija ļauj in situ dinamiski un kvantitatīvi novērot un izmērīt dzīvās šūnas un audus.
